Instrumentation science & technology
2017
Sun YS, Zhu XD
细胞表面碳水化合物通过与其他生物分子相互作用介导细胞行为。由于碳水化合物结构复杂、多样且异质，全面表征其种类及结合伙伴十分困难。为此，糖组学领域发展了碳水化合物微阵列和无标记检测等新技术。本文报道将寡糖微阵列与无标记斜入射反射率差显微镜（OI-RD）相结合，用于实时表征寡糖结合蛋白。作者将氨基化人乳寡糖固定在环氧涂层玻璃基底上，制备...
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
2017
Clifton BE, Whitfield JH, Sanchez-Romero I, Herde MK 等 7 人
基于 Förster 共振能量转移（FRET）的小分子生物传感器可在复杂细胞环境中以高时空分辨率监测小分子信号。FRET 传感器通常由一对荧光蛋白与合适的识别域（如溶质结合蛋白 SBP 超家族成员）融合构建。然而，天然 SBP 热稳定性低，可能限制生理条件下成像；其 N/C 端位置也可能不利于荧光蛋白融合，从而限制传感器动态范围。本...
PloS one
2012
Bourdès A, Rudder S, East AK, Poole PS
FRET生物传感器可实时检测生物重要配体，但目前仅覆盖22种化合物、8类物质。为扩展可用传感器，作者利用Sinorhizobium meliloti转运组的诱导谱系统筛选新的FRET传感器。研究开发了两种用于在FRET荧光蛋白之间克隆溶质结合蛋白（SBP）基因的新载体：除常用青色/黄色荧光蛋白（CFP/YFP）对外的pCYS载体外，...