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pHLARE: a new biosensor reveals decreased lysosome pH in cancer cells.

Molecular biology of the cell 2021 Webb BA, Aloisio FM, Charafeddine RA, Cook J 等 6 人

许多溶酶体功能取决于约5.0的腔内pH,包括酸性水解酶活性。溶酶体pH(pHlys)在神经退行性疾病中常升高,在癌症中预测降低,因此可能成为限制疾病进展的治疗靶点。然而,现有染料常积累于多种细胞器,不能用于克隆细胞纵向研究或体内测定。为解决这一限制,作者开发了一种基因编码的比率型pHlys生物传感器pHLARE(pH Lysosom...

Live imaging of intra-lysosome pH in cell lines and primary neuronal culture using a novel genetically encoded biosensor.

Autophagy 2021 Ponsford AH, Ryan TA, Raimondi A, Cocucci E 等 8 人

溶酶体生理紊乱日益被认为是多种神经发育障碍和衰老相关疾病的重要病理基础,其中溶酶体酸化缺陷可触发溶酶体应激信号并削弱蛋白水解能力。本研究开发了一种基因编码的比率型荧光探针RpH-LAMP1-3xFLAG,将pH敏感荧光蛋白pHluorin与参考荧光蛋白mCherry串联融合于小鼠LAMP1的腔内结构域,并在胞质侧引入3xFLAG纯化...