ACS applied materials & interfaces
2017
Li Z, Narouz MR, Munro K, Hao B 等 7 人
表面化学是多种生物传感应用的关键使能因素。基于表面等离子共振（SPR）的生物传感器通常采用硫醇化学作为金基底与功能生物传感表面之间的连接层，但已有研究表明，此类传感表面在氧气存在下易发生氧化/降解，以往提高稳定性的努力进展有限。作为替代方案，近期在金表面沉积N-杂环卡宾（NHC）自组装单分子层（SAM）的研究显示出显著潜力。本文报道...
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
2017
Clifton BE, Whitfield JH, Sanchez-Romero I, Herde MK 等 7 人
基于 Förster 共振能量转移（FRET）的小分子生物传感器可在复杂细胞环境中以高时空分辨率监测小分子信号。FRET 传感器通常由一对荧光蛋白与合适的识别域（如溶质结合蛋白 SBP 超家族成员）融合构建。然而，天然 SBP 热稳定性低，可能限制生理条件下成像；其 N/C 端位置也可能不利于荧光蛋白融合，从而限制传感器动态范围。本...
Protein expression and purification
2017
Ho TT, Nguyen JT, Liu J, Stanczak P 等 14 人
近年来，稳定并结晶 GPCR 的创新方法推动了 GPCR 晶体结构解析，并使纯化受体可用于生物物理和生化配体结合实验。然而，为适配这些技术，蛋白优化过程漫长，需要反复表达、溶解、纯化和功能分析数十至数百个蛋白变体。本文报道一种新颖且通用的方法，在 HEK293 细胞产生的病毒样颗粒（VLP）中平行筛选数百个 GPCR 变体的蛋白产量...