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Live-cell biosensors based on the fluorescence lifetime of environment-sensing dyes.

Cell reports methods 2024 Mehl BP, Vairaprakash P, Li L, Hinde E 等 9 人

本文研究环境敏感荧光染料在荧光寿命成像显微镜(FLIM)生物传感器中的应用。作者筛选了一系列 merocyanine 染料,寻找环境诱导荧光寿命变化、光稳定性和亮度在活细胞成像波长下的最佳组合。最终构建 mero87-CBD 生物传感器,将环境敏感染料通过半胱氨酸反应性连接基共价连接至选择性结合激活态 Cdc42 的亲和试剂(WAS...

Ratiometric Imaging Using a Single Dye Enables Simultaneous Visualization of Rac1 and Cdc42 Activation.

Journal of the American Chemical Society 2016 MacNevin CJ, Toutchkine A, Marston DJ, Hsu CW 等 10 人

基于环境敏感荧光染料的生物传感器可用于在活体中报告内源蛋白活性。染料可连接至选择性结合目标蛋白特定构象的试剂,结合后引起荧光变化。适用于低浓度、非扰动细胞内检测的明亮染料通常只发生荧光强度变化,而非激发或发射峰位移,因此难以通过比率成像精确量化。本文报道了一种环境敏感染料 mero199,其激发峰随溶剂极性发生 33 nm 位移。利...

Environment-sensing merocyanine dyes for live cell imaging applications.

Bioconjugate chemistry 2013 MacNevin CJ, Gremyachinskiy D, Hsu CW, Li L 等 7 人

基于环境敏感染料的荧光生物传感器可在活细胞内实现内源蛋白激活的可视化与定量。紫精(merocyanine)染料因亮度高、激发与发射波长长,并能随微环境变化产生明显荧光响应,而特别适合活细胞成像。本文通过5种给体杂环与5种受体杂环的组合反应,系统合成了25种紫精染料,考察结构特征对染料亮度、环境响应性和光稳定性的影响。其中4种染料表现...