Cell reports methods
2024
Mehl BP, Vairaprakash P, Li L, Hinde E 等 9 人
本文研究环境敏感荧光染料在荧光寿命成像显微镜(FLIM)生物传感器中的应用。作者筛选了一系列 merocyanine 染料,寻找环境诱导荧光寿命变化、光稳定性和亮度在活细胞成像波长下的最佳组合。最终构建 mero87-CBD 生物传感器,将环境敏感染料通过半胱氨酸反应性连接基共价连接至选择性结合激活态 Cdc42 的亲和试剂(WAS...
Communications biology
2022
Tittelmeier J, Druffel-Augustin S, Alik A, Melki R 等 5 人
突触核蛋白病是一组以病理性α-突触核蛋白(α-Syn)进行性积累为特征的神经退行性疾病。α-Syn淀粉样聚集体存在结构多态性,可能决定不同疾病表型与进展,但机制不清。本研究采用荧光寿命成像显微镜(FLIM)及其phasor无拟合分析方法,在表达α-SynA53T-YFP报告蛋白的生物传感器细胞系中监测体外制备α-Syn纤维多态体的种...
Biophysical journal
2013
Golfetto O, Hinde E, Gratton E
Laurdan 的荧光特性已被证明是研究模型膜和活细胞膜堆积及有序脂质相的有效工具。传统上,Laurdan 发射光谱从有序脂质相的蓝色向无序脂质相的绿色移动,通过广义极化(GP)函数定量。本文研究 Laurdan 在两个不同发射波长下的荧光寿命,发现当将其发射的偶极弛豫在光谱上分离后,荧光衰减分析能够区分膜流动性变化与胆固醇含量变化...
Microscopy research and technique
2012
Hinde E, Digman MA, Welch C, Hahn KM 等 5 人
本文提出基于荧光寿命成像显微镜(FLIM)的相量(phasor)方法用于生物传感器 Förster 共振能量转移(FRET)检测,并证明该方法对生物传感器设计以及细胞环境中固有的荧光伪影具有稳健性。作者以一系列双链和单链 GTPase 生物传感器为对象,这些传感器用于报告 Rac1 和 RhoA 活性的亚细胞定位;同时对所获得的 F...