Protein science : a publication of the Protein Society
2016
Geuijen KP, Egging DF, Bartels S, Schouten J 等 6 人
蛋白化学生物素化及链霉亲和素或抗生物素捕获常作为将蛋白固定于生物传感器表面的可控替代方案。生物素化可能阻断感兴趣相互作用位点,降低表观活性;最小生物素化可减轻活性损失,但若标记参与结合的氨基酸仍可能阻断结合位点。本文以低亲和力 Fcγ 受体为模型,开展最小标记反应条件优化研究。该类蛋白在 IgG 结合活性位点含多个赖氨酸,适合研究最...
ACS applied materials & interfaces
2016
Li G, Zhu M, Ma L, Yan J 等 7 人
以睾酮免疫双峰驼后,构建了重链抗体可变域(VHH)或纳米抗体(Nb)噬菌体展示库。纳米抗体分子量小(15 kD)、溶解性好、稳定性高、亲和力和特异性高、免疫原性低,是下一代诊断和医学应用的有前景工具。睾酮是生殖激素,在正常心脏功能中起重要作用,也是多种疾病的高预测标志物。本文成功开发了一种基于电化学阻抗谱(EIS)和纳米抗体的简单灵...
Journal of molecular recognition : JMR
2016
Dorion-Thibaudeau J, St-Laurent G, Raymond C, De Crescenzo G 等 5 人
本文报道了四种生物素化 Fcγ 受体(FcγR)胞外域的生产及其在链霉亲和素生物传感器表面上的稳定捕获。受体生物素化采用哺乳动物细胞共转染策略:将编码 FcγR 胞外域(融合生物素受体肽 BAP)和 BirA 酶的质粒共同转染细胞,实现胞内定点生物素化,并与标准体外酶法生物素化在生物素化水平和产量方面进行比较。两种策略制备的生物素化...