铜是必需微量元素，参与多种人体酶功能，铜缺乏或铜转运遗传缺陷可导致严重甚至致命疾病。Rae等曾预测细胞质中游离铜离子水平极低，通常低到难以观测。我们近期开发了一种人源脱辅基碳酸酐酶II（hCA II）变体，用于金属离子传感，其对Cu(II)相对于Zn(II)的选择性比野生型蛋白提高25倍，从而能够在普通细胞皮摩尔游离锌存在下准确测量...
本文报道一种基于蛋白的发射比率荧光生物传感器，用于检测溶液中游离锌离子，灵敏度达皮摩尔水平。该传感器以去锌碳酸酐酶II为识别单元，Alexa Fluor 594共价标记于His36Cys位点作为荧光供体；当Zn2+结合去锌酶后，促进Chesapeake Blue磺酰胺进入活性中心并作为FRET受体。590 nm激发下，供体617 n...
锌是多种细胞过程所必需的微量元素，其稳态在生物体内受到严格调控。荧光传感器已成为监测活细胞中可交换锌浓度的重要工具。一类生物传感器以碳酸酐酶（CA）为识别元件，利用其可调亲和力、优异金属选择性以及芳基磺酰胺配体结合锌后产生的荧光信号。本研究将碳酸酐酶与红色荧光蛋白融合，构建了一系列基因编码的基于 Förster 共振能量转移（FRE...
本文报道一种基于荧光寿命的锌离子生物传感器，用于在含干扰离子的溶液（如海水）中定量痕量锌。传感体系由脱锌人碳酸酐酶II（apo-carbonic anhydrase II, apo-CA II）和荧光抑制剂丹磺酰胺（dansylamide, DNSA）组成。Zn2+ 先与 apo-CA II 活性位高亲和力结合，随后诱导 DNSA ...