DNA磷酸化是DNA复制、修复和重组等正常细胞过程的关键事件，因此开发准确、便捷的激酶活性及其抑制检测方法具有重要意义。本文报道了一种用于T4多聚核苷酸激酶（T4 PNK）的新型电化学生物传感策略。首先将单链DNA探针固定于电极表面；在目标T4 PNK催化下，探针5'-羟基端被磷酸化，随后与氨基标记DNA探针通过特定杂交形成可连接结...
本研究开发了一种基于二氧化钛纳米管（TiO2 NTs）和滚环扩增（RCA）策略的超灵敏电化学生物传感器，用于检测T4多聚核苷酸激酶（T4 PNK）活性。固定于电极表面的T4 PNK底物探针具有5′端羟基，在ATP存在下被T4 PNK磷酸化，生成的5′磷酸基团可与TiO2 NTs结合，并进一步连接磷酸标记引物。加入环状模板、phi29...
蛋白激酶活性分析对阐明细胞信号转导、疾病诊断和药物发现具有重要意义。本文报道了一种基于还原氧化石墨烯-二氧化锆-硫堇（rGO-ZrO2-Thi）纳米复合材料的新型电化学生物传感方法，用于蛋白激酶A（PKA）活性检测。该纳米复合材料通过水热法制备二氧化锆纳米颗粒修饰的还原氧化石墨烯（rGO-ZrO2），再经π-π堆积将硫堇（Thi）结...
本文报道了一种用于超灵敏、无标记测定蛋白激酶活性的电化学生物传感器。该传感器由金电极表面的独特肽单层构成，通过方波伏安法（SWV）识别磷酸化引起的单层有序度变化。当激酶将磷酸基团引入肽序列中部的丝氨酸残基时，磷酸基团导致肽单层无序化并形成针孔，使氧化还原探针更容易接近金电极，从而增大电化学信号。作者测得该传感器对激酶的灵敏度为 10...
监测蛋白激酶活性和筛选抑制剂对激酶相关药物发现、疾病早期诊断及疗效评价具有重要意义。本文开发了一种基于羧肽酶Y（CPY）消化触发信号放大的简单电化学方法，用于检测酪蛋白激酶II（CK2）活性。在该策略中，CK2催化底物肽发生磷酸化，磷酸化位点保护底物肽免受CPY从C端水解，使电极表面保留带负电的肽片段，从而维持对氧化还原探针Fe(C...
本文报道一种基于TiO2辅助银纳米颗粒增强的电化学生物传感器，用于蛋白激酶活性及其抑制的灵敏检测。以蛋白激酶A（PKA）为模型酶，Kemptide为底物肽，通过巯基乙酸（MAA）和EDC-NHS化学将其固定于金电极表面。PKA在ATP存在下催化Kemptide磷酸化，生成的磷酸基团与TiO2纳米颗粒特异性结合，实现磷酸化产物的富集与...
本文报道一种用于电化学测定蛋白激酶活性的多用途肽基生物传感器。该传感器以氧化还原活性辅底物腺苷5′-[γ-二茂铁]三磷酸（Fc-ATP）为核心，使激酶催化将γ-磷酸-二茂铁转移到羟基氨基酸上，从而通过电化学检测磷酸化事件。作者将该方法用于监测丝氨酸/苏氨酸激酶CK2以及酪氨酸激酶Abl1-T315I和HER2在缓冲液和细胞裂解液中的...