Ancestral Protein Reconstruction and Circular Permutation for Improving the Stability and Dynamic Range of FRET Sensors.

Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) 2017 Clifton BE, Whitfield JH, Sanchez-Romero I, Herde MK 等 7 人

基于 Förster 共振能量转移（FRET）的小分子生物传感器可在复杂细胞环境中以高时空分辨率监测小分子信号。FRET 传感器通常由一对荧光蛋白与合适的识别域（如溶质结合蛋白 SBP 超家族成员）融合构建。然而，天然 SBP 热稳定性低，可能限制生理条件下成像；其 N/C 端位置也可能不利于荧光蛋白融合，从而限制传感器动态范围。本...

荧光生物传感器 FRET生物传感器祖先蛋白重建环状置换溶质结合蛋白

Construction of a robust and sensitive arginine biosensor through ancestral protein reconstruction.

Protein science : a publication of the Protein Society 2015 Whitfield JH, Zhang WH, Herde MK, Clifton BE 等 8 人

信号分子生物传感器可结合蛋白工程、荧光成像与细胞生物学，用于研究生理过程。遗传编码生物传感器的构建通常依赖既特异又稳定的结合核心，再与荧光分子偶联形成传感元件；但自然界中常缺乏满足要求的结合蛋白，且现有传感器在稳定性方面仍需改进。祖先蛋白重建是一种可产生高稳定性功能蛋白的蛋白工程方法。本研究以 L-精氨酸为对象，利用祖先蛋白重建与环...

荧光生物传感器 精氨酸生物传感器FRET祖先蛋白重建荧光蛋白