目前最成功的基因编码钙指示剂（GECI）多采用荧光强度或比率读出。尽管钙依赖的荧光强度变化较大，但强度易受光漂白、样品移动和探针局部浓度变化影响，且 GECI 对生理 pH 变化敏感，因此难以准确定量细胞内钙浓度。本文报道一种基于荧光寿命的传感策略：钙结合诱导的构象变化直接改变循环置换绿松石荧光蛋白（cpTq2）的荧光量子产率和荧光...
开发能够响应细胞内钙信号的合成转录因子，可在单细胞水平分析细胞事件或重构细胞内信息网络。本研究构建了一种钙依赖性转录因子（CaTF），其胞质中的钙蛋白酶敏感序列在胞内钙升高时被钙蛋白酶（calpain）切割，使含TetR DNA结合域和VP16激活域的片段进入细胞核，并结合tetO启动子诱导报告基因表达。结果显示，CaTF介导的报告...
高血压中动脉狭窄只能源于动脉结构重塑或平滑肌收缩增强，后者可伴或不伴细胞内钙浓度（[Ca2+]i）升高。本研究利用表达 Ca2+/calmodulin FRET 生物传感器的转基因小鼠，通过皮下持续输注血管紧张素 II（Ang II，400 ng kg−1 min−1，2–3 周）建立高血压模型，并在活体麻醉小鼠中用荧光显微镜同时测...
背景与目的：活体中确定血管受体作用困难，难以通过全身拮抗或基因操作实现。本研究用活体荧光显微镜测量交感受体，尤其α1-肾上腺素能受体亚型，对小鼠股动脉收缩激活的贡献。方法：在表达MLCK钙-钙调蛋白生物传感器的小鼠中，活体荧光显微镜测定股动脉直径和细胞内钙（[Ca2+]i），并局部应用药理学试剂判断血管受体对张力性收缩和[Ca2+]...
控制动脉直径的细胞机制在高血压中仍不明确。本文报道一种方法，可在1.5%异氟烷麻醉的活鼠中同时记录动脉平滑肌细胞内钙浓度（[Ca2+]i）、肌球蛋白轻链激酶（MLCK）激活分数和动脉外径，并与动脉血压同步。该方法还能评估局部受体活性对[Ca2+]i、MLCK活性和直径的影响，而不受全身效应干扰。研究使用在平滑肌中表达钙/钙调蛋白激活...