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In vivo assessment of artery smooth muscle [Ca2+]i and MLCK activation in FRET-based biosensor mice.

American journal of physiology. Heart and circulatory physiology 2010 Zhang J, Chen L, Raina H, Blaustein MP 等 5 人

控制动脉直径的细胞机制在高血压中仍不明确。本文报道一种方法,可在1.5%异氟烷麻醉的活鼠中同时记录动脉平滑肌细胞内钙浓度([Ca2+]i)、肌球蛋白轻链激酶(MLCK)激活分数和动脉外径,并与动脉血压同步。该方法还能评估局部受体活性对[Ca2+]i、MLCK活性和直径的影响,而不受全身效应干扰。研究使用在平滑肌中表达钙/钙调蛋白激活...

Activation by Ca2+/calmodulin of an exogenous myosin light chain kinase in mouse arteries.

The Journal of physiology 2009 Raina H, Zacharia J, Li M, Wier WG

本研究利用表达外源肌球蛋白轻链激酶(MLCK)荧光共振能量转移(FRET)活性生物传感器的转基因小鼠,研究完整肠系膜动脉中 Ca2+/钙调蛋白(Ca2+/CaM)对 MLCK 的激活与调节。高外钾使细胞内 Ca2+(fura-2 比值或 fluo-4 荧光)和 MLCK FRET 比值均快速升至峰值后先快后慢下降;张力先出现相性峰值...

Signaling processes for initiating smooth muscle contraction upon neural stimulation.

The Journal of biological chemistry 2009 Ding HL, Ryder JW, Stull JT, Kamm KE

本研究确定参与Ca2+/钙调蛋白(CaM)依赖性平滑肌肌球蛋白调节轻链(RLC)磷酸化的信号过程关系。作者在转基因小鼠平滑肌中表达基因编码生物传感器MLCK,实时测量神经刺激3 s的小鼠膀胱平滑肌条中[Ca2+]i、MLCK激活与张力。[Ca2+]i和激酶激活潜伏期分别为55±8 ms和65±6 ms,二者在100 ms随RLC磷酸...

A technique for simultaneous measurement of Ca2+, FRET fluorescence and force in intact mouse small arteries.

The Journal of physiology 2008 Wier WG, Rizzo MA, Raina H, Zacharia J

Förster 共振能量转移(FRET)生物传感器分子是揭示细胞内特定分子相互作用的重要工具,但通常用于培养细胞,而培养细胞与完整机体中的细胞在基因表达和生理刺激/输出测量方面存在差异。本研究利用表达 FRET 型肌球蛋白轻链激酶(MLCK)生物传感器分子的转基因小鼠,报道了一种在完整、功能小鼠小动脉平滑肌细胞中动态观察 MLCK ...