细胞表面展示技术可将蛋白表达并锚定在微生物细胞表面，在蛋白文库筛选、生物催化和生物传感器开发等领域具有应用前景。但传统体系存在局限：噬菌体展示蛋白分子量受限；细菌展示缺乏真核蛋白翻译后修饰；酵母展示易过度糖基化并导致多亚基蛋白错误折叠；枯草芽孢杆菌孢子展示兼容性仍需提高。本研究建立基于酿酒酵母孢子天然“壳聚糖微球”的新型细胞表面展示...
随着工业活动增加，汞大量排入环境并造成严重污染，其生物毒性对人类健康构成威胁，因此需要简单快速的现场监测手段。本研究通过直接修饰荧光蛋白 mCherry 的发色团微环境，成功设计了一种用于 Hg2+ 传感的“关闭型”荧光生物传感器 mCherry L199C。为便于快速筛选与表征，利用细胞表面展示技术将该 mCherry 变体直接表...
尽管成像技术不断进步，在活细胞中实时可视化并定量内源蛋白的功能状态仍是细胞生物学与显微成像的重要挑战。本文报道了一种基于质粒的荧光生物传感器，用于实时测量基质金属蛋白酶-14（MMP14）在细胞中的位置、活性及时间动态。该传感器将荧光原激活蛋白技术与 MMP14 选择性蛋白酶底物序列相结合，构建出二元“开关式”荧光报告系统：当 MM...
神经紧张素受体1（NTSR1）是G蛋白偶联受体（GPCR）家族成员，可被神经紧张素肽激活并引发多种生理效应。酿酒酵母是检测人GPCR激动激活的成熟宿主体系。前期研究表明，酵母可功能表达人NTSR1，并利用ZsGreen荧光报告基因检测神经紧张素诱导的信号；但相比表达其他人GPCR（如生长抑素受体）的酵母，NTSR1表达酵母的荧光强度...
近期报道的荧光生物传感器平台利用单链抗体片段（scFv）选择性结合并激活原本无荧光的荧光素分子。本研究将串联 scFv 生物传感器展示于哺乳动物细胞表面，以推进荧光检测策略。作者首先筛选不同肽连接子，发现柔性连接子或 α-螺旋连接子连接的串联蛋白可正确折叠并展示于细胞表面。随后进行 scFv 二聚体组合研究，发现荧光激活与 scFv...
本研究系统考察了通过定点突变替换枯草芽孢杆菌葡萄糖脱氢酶（GDH）四个氨基酸后，细胞表面展示 GDH 突变体稳定性和底物特异性的改善情况。将 E170R/Q252L、V149K/E170R/Q252L、E170R/Q252L/G259A 和 V149K/E170R/Q252L/G259A 等突变 GDH 与冰核蛋白（INP）融合，展...
本研究采用细胞表面展示策略，将金结合多肽（GBP）融合蛋白展示于大肠杆菌表面，从而实现细胞在金表面的固定。编码GBP的DNA与截短fadL基因融合，由tac启动子表达；为展示Streptomyces avidinii的核心链霉亲和素（cSA），将cSA基因与截短oprF基因融合。在大肠杆菌表面同时展示FadL–GBP和OprF–cS...