细胞表面展示技术可将蛋白表达并锚定在微生物细胞表面，在蛋白文库筛选、生物催化和生物传感器开发等领域具有应用前景。但传统体系存在局限：噬菌体展示蛋白分子量受限；细菌展示缺乏真核蛋白翻译后修饰；酵母展示易过度糖基化并导致多亚基蛋白错误折叠；枯草芽孢杆菌孢子展示兼容性仍需提高。本研究建立基于酿酒酵母孢子天然“壳聚糖微球”的新型细胞表面展示...
具有商业价值的酶（如脂肪酶、淀粉酶、漆酶、植酸酶、碳酸酐酶、果胶酶、麦芽糖酶、葡萄糖氧化酶等）具有多功能特性，已广泛应用于精细化工、环境、医药、化妆品、能源、食品、农业和营养保健品等领域。然而，生物催化剂在苛刻工业条件下常存在稳定性差、难以回收和重复使用等局限。将酶固定化可显著提高其操作稳定性、催化活性并便于重复使用。目前，功能化聚...
为开发便捷高效的有机磷（OP）杀虫剂检测方法，作者构建了一种简单、低成本且易操作的吸光度型传感装置：将甲基对硫磷水解酶与谷胱甘肽-S-转移酶融合蛋白（MPH-GST）共价固定于壳聚糖膜涂覆的微孔板上。以甲基对硫磷（MP）为代表底物，该MPH-GST传感微孔板的检测限为0.1 μM，线性范围为0.1–50 μM。尽管在4 °C下稳定性...
本研究描述绿青霉 L-赖氨酸-α-氧化酶（LO）通过共交联固定于铂电极表面后的动力学行为。所得安培生物传感器可分析 L-赖氨酸，从而对固定化酶进行简单而系统的动力学研究。结果表明，LO 呈现变构行为，且协同性强烈依赖 pH；在高 pH 下协同性还依赖底物浓度，并符合 Monod-Wyman-Changeux（MWC）变构酶模型预测。...
本文通过环保水热法合成多壁碳纳米管-二硫化钼三维纳米复合材料（MWCNT-MoS2 NC），并采用光谱与显微技术表征其微观结构。该纳米复合材料经戊二醛活化后，作为固定化 Lens culinaris β-半乳糖苷酶（Lsbgal）的平台，固定化效率达 93%。原子力显微镜、场发射扫描电镜、傅里叶变换红外光谱和共聚焦激光扫描显微镜证实...
基于酶的生物传感装置在过去几十年中得到广泛开发，并已被证明是多种目标底物定性与定量分析的创新技术，应用范围广泛。酶生物传感器具有高灵敏度和高特异性、便携、成本低、可微型化以及可用于即时诊断等显著优势，因此越来越受到临床分析、食品安全控制和疾病监测研究的关注。本综述系统介绍了利用电化学、光学、热敏电阻和压电测量技术的酶生物传感器工作原...
本研究将纳米钻石（ND）与聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA）混合，经静电纺丝制备掺有纳米钻石的 PMMA 纳米纤维（nfPMMA-ND），用于固定辣根过氧化物酶（HRP）。在 10% ND 和 pH 7.0 条件下，HRP 固定效率最高，达 96%。采用 ATR-FTIR、SEM 和 TEM 对固定化酶进行表征。固定化酶经 10 次重复使...
本研究制备了聚苯胺/钴/多壁碳纳米管纳米复合材料（PANI/Co/MWCNTNC），用于固定化米曲霉来源的β-半乳糖苷酶（β-galactosidase, β-Gal）。复合材料通过多壁碳纳米管（MWCNT）在盐酸和十二烷基硫酸钠（SDS）中分散，加入氯化钴（CoCl2）和苯胺单体，再以过硫酸铵（APS）原位氧化聚合聚苯胺（PANI...
本研究研究了用于测定丙酮酸（PA）和乳酸（LA）的微体积荧光毛细管生物传感器的制备条件。在优化条件下，该生物传感器可用于顺序定量 0.10–1.2 mM 范围内的 LA 和 4–120 μM 范围内的 PA；对人血清样品，PA 和 LA 的回收率处于令人满意的 97–106% 范围，LA 的检出限为 0.023 mM（RSD < 1...
葡萄糖氧化酶（GOx）在生物传感器和生物催化中具有重要应用。本研究首先采用 EDC/NHS 法将 3-氨基丙基三乙氧基硅烷（APTES）共价接枝到 GOx 表面，并通过 ICP 定量分析不同 APTES 用量下 GOx 表面的硅烷结合效率。结果表明，接枝硅烷含量并未显著改变各表面修饰 GOx 的相对活性和三级结构。与天然酶相比，AP...
本文提出合成并表征石墨烯，用于固定化β-半乳糖苷酶以提高半乳寡糖（GOS）产量。透射电镜显示所合成石墨烯尺寸约为25 nm，傅里叶变换红外光谱用于观察酶与纳米载体之间的相互作用。采用分子对接程序Dock v.6.5进行对接，并利用Chimera v.1.6.2和PyMOL v.1.3对蛋白—配体复合物进行可视化分析。固定化β-半乳糖...
本综述阐述生物发光酶毒性生物测定的一般原理，并描述这些方法在生态、医疗、工业和环境领域的应用及其在商业生物传感器中的实现。文中提出生物发光酶系统技术（BEST），以细菌偶联酶系统 NADH:FMN-氧化还原酶-荧光素酶替代活体生物，用于快速、低成本地构建酶学毒性检测系统。为推广 BEST，作者开发多组分试剂 Enzymolum，将细...
本文提出一种制备磁性可回收酶基生物反应器的方法，将酶共价固定于铁氧化物@二氧化硅纳米颗粒表面。首先合成平均直径约68 nm的铁氧化物团簇，并通过二氧化硅包覆获得球形γ-Fe2O3@SiO2核壳纳米颗粒，平均直径约200 nm，具有磁响应性和增强的胶体稳定性。随后对颗粒表面进行两步化学修饰：先引入氨基，再转化为羧基功能基团；羧基经ED...
本综述系统阐述了流动注射分析中热敏生物传感器与微型生物传感器的工作原理和主要特征，重点介绍酶热敏电阻（enzyme thermistor, ET）的通用性与优异的操作稳定性。文中以原始型酶热敏电阻为例，说明其通常由固定化酶柱与流动微热量计组成，并讨论厚膜热敏电阻、热电堆等温度换能器以及便携式、芯片化微型结构。综述还涵盖分子印迹聚合物...
室内空气中甲醛（FA）危害健康，需通过通风或催化转化去除。本文从过表达醇氧化酶（AOX）的多形汉森酵母 C-105（gcr1 catX）突变体中分离 AOX，并将其固定于海藻酸钙微球中，用于连续流化床生物反应器（FBBR）中氧化气相 FA。固定化 AOX 比活为 6–8 U mg−1 蛋白，保留 85–90% 初始活性，且催化参数与...
基于固定化酶技术和荧光毛细管分析方法，作者开发了一种高灵敏度荧光反应体系和新型固定化多酶葡萄糖荧光毛细管生物传感器，用于测定葡萄糖含量。反应原理为：固定于医用毛细管内壁的葡萄糖氧化酶（GOD）和辣根过氧化物酶（HRP）催化下，β-D-葡萄糖与溶解氧反应生成葡萄糖酸-γ-内酯和过氧化氢；随后过氧化氢与L-酪氨酸反应生成酪氨酸二聚体，其...
原位分析固定化酶是将酶嵌入标准集成电路和微机电系统平面技术、构建生物反应器或酶联生物传感器的关键步骤。本文基于质量传递动力学和 Michaelis-Menten 方程，发展了一种表面反应限制模型，用于系统、标准化地测定平面表面上固定化酶的表观 Michaelis-Menten 常数 K*m 和单位催化表面积最大反应速率 V*max。...
本研究评估了固定化蛋白磷酸酶（PP）生物传感器检测微囊藻毒素和岩藻毒素的可行性。将PP固定化于CNBr活化琼脂糖微球，并置于Millipore微滤板孔中，在优化条件下以荧光底物MUP实时监测酶活性。固定化PP-2A被岩藻毒素（OA）和微囊藻毒素LR（MC-LR）抑制，IC50分别为12.5和11 nM；固定化重组PP-1对MC-LR...
本文提出一种固定化酶荧光毛细管生物传感器（SBAs-IE-FCBS），用于尿液中硫酸化胆汁酸（SBAs）的测定。该传感器将胆汁酸硫酸酯酶（BSS）和3β-羟基类固醇脱氢酶（3β-HSD）固定于医用毛细管内壁。在BSS催化下，SBAs脱硫酸生成3β-羟基胆汁酸；在3β-HSD催化下，3β-羟基胆汁酸与NAD+反应生成3-酮类固醇和NA...