Design and synthesis of fluorescent activity probes for protein phosphatases.
蛋白磷酸酶与蛋白激酶协同调控并维持细胞磷酸化蛋白质组，但直接监测磷酸酶活性的化学工具长期落后于激酶。本章提供将磷酸化敏感的磺酰胺氧啶荧光团Sox重新利用为蛋白磷酸酶直接活性探针的设计、合成与验证方案。作者首先给出Sox-溴化物（Sox-Br）和Fmoc-Cys(Sox[TBDPS])-OH（Fmoc-CSox）的合成路线，用于固相肽...
Phosphorylation-Mediated Assembly of a Semisynthetic Fluorescent Protein for Label-Free Detection of Protein Kinase Activity.
蛋白磷酸化由蛋白激酶催化，在细胞内信号转导、代谢、基因表达和免疫应答等过程中起关键作用，因此检测激酶活性对生化研究和药物发现具有重要意义。本文开发了一种基于半合成绿色荧光蛋白（GFP）磷酸化介导组装的新型荧光生物传感器，用于无标记检测蛋白激酶活性。作者合成了由GFP第10条β链（s10）与激酶底物肽组成的嵌合肽S-peptide。蛋...
Sensitive biosensor based on recombinant PP1α for microcystin detection.
本文报道了一种基于重组蛋白磷酸酶1α（PP1α）抑制的电化学微囊藻毒素-LR（MC-LR）生物传感器。作者利用新型重组酶筛选了多种商用底物，发现只有1-萘基磷酸酯（1-NPP）和磷酸对乙酰氨基酚（PPAR）对PP1α具有良好亲和力。经典比色动力学分析表明，PPAR是优良的合成底物，Km为1.2 mM。该传感器通过将PP1α包埋于含叠...
Assessment of protein phosphatase in a re-usable rapid assay format in detecting microcystins and okadaic acid as a precursor to biosensor development.
本研究评估了固定化蛋白磷酸酶（PP）生物传感器检测微囊藻毒素和岩藻毒素的可行性。将PP固定化于CNBr活化琼脂糖微球，并置于Millipore微滤板孔中，在优化条件下以荧光底物MUP实时监测酶活性。固定化PP-2A被岩藻毒素（OA）和微囊藻毒素LR（MC-LR）抑制，IC50分别为12.5和11 nM；固定化重组PP-1对MC-LR...