Bioelectrochemistry (Amsterdam, Netherlands)
2019
Li Y, Gong B, Liang X, Wu Y
以假单胞菌 Pseudomonas borealis DL7 的冰核蛋白(INP)为锚定基序、大肠杆菌麦芽糖结合蛋白(MBP)为增溶增强子,将日本晴水稻细胞分裂素氧化酶 OsCKX4 成功展示于大肠杆菌细胞表面。展示 OsCKX4 的细菌可直接固定于电极表面,用于选择性检测细胞分裂素,从而省去酶提取和纯化步骤。在 pH 7.0 磷酸...
Analytica chimica acta
2015
Liang B, Zhang S, Lang Q, Song J 等 6 人
本文报道了一种基于细菌表面展示谷氨酸脱氢酶(Gldh-bacteria)的新型 L-谷氨酸生物传感器。以冰核蛋白(INP)N 端区域为锚定基序,在大肠杆菌(E. coli)表面表达 NADP+ 依赖型 Gldh。细胞分级实验和 SDS-PAGE 分析表明,大部分 INP-Gldh 融合蛋白位于细胞表面。传感器通过依次在玻碳电极(GC...
Biosensors & bioelectronics
2013
Liang B, Li L, Tang X, Lang Q 等 11 人
本研究首次构建了以冰核蛋白(INP)为锚定基序、在大肠杆菌表面展示葡萄糖脱氢酶(GDH)的工程菌株。SDS-PAGE、Western blot和酶活测定证实融合蛋白定位于细胞表面且保持功能,INP不影响GDH辅因子结合域;细胞裂解液中74.6%的GDH活性位于外膜。与胞内表达GDH的粗酶液相比,GDH展示菌在pH 6–10、40 ℃...
Biosensors & bioelectronics
2012
构建了一种新型 Nafion/细菌表面展示木糖脱氢酶(XDH)/多壁碳纳米管(MWNTs)复合膜修饰电极,用于灵敏、选择性测定 D-木糖(INS 967)。XDH 展示细菌以新鉴定的 Pseudomonas borealis DL7 冰核蛋白作为锚定基序制备,可直接使用,省去酶提取纯化,提高酶稳定性。优化条件:将 10 μL 均匀 ...