本研究提出一种基于 PW17-OG 体系的无标记、特异性荧光传感适配体方法，用于检测惰性气体氡。该方法以花菁染料 OliGreen（OG）作为信号反应物，以适配体 PW17 作为荧光识别探针。当 OG 嵌入自由卷曲状态的 PW17 时，产生强荧光信号。氡衰变后，其长寿命天然子体铅被收集并引入体系；铅离子诱导 PW17 形成稳定 G-...
单荧光蛋白生物传感器（SFPBs）可在活细胞内以单细胞时空分辨率定量代谢物，但将绿色荧光蛋白（GFP）理性插入配体结合域并形成有效变构耦合仍是构建瓶颈。本文提出一种无偏高通量方法——基于 DNA 测序的域插入分析（DIP-seq），通过转座子介导的随机域插入快速构建大量潜在 SFPB 文库，并结合流式细胞分选（FACS）与下一代测序...
本文报道了一种用于小分子适配体传感器的体外筛选与扩增协议。作者优化了基于结构切换（structure-switching）的 SELEX 方法，可直接获得小分子适配体传感器。该方法无需化学修饰目标小分子，而是在溶液相中使用天然状态目标；通过生物素化捕获链将寡核苷酸文库固定于链霉亲和素琼脂糖柱上，目标结合诱导文库构象切换并使其从柱上洗...
近年来，开发用于烷烃生产、生物传感和生物修复的合成微生物平台受到关注，但控制烷烃进入宿主细胞的速率仍是关键问题，且天然转运组分尚不明确。本研究以假单胞菌 GPo1 的 AlkBGT 烷烃单加氧酶复合物作为报告系统，评估大肠杆菌中烷烃导入，并评价两种天然转运蛋白 FadL 和 OmpW 对辛烷的转运功能。结果显示，删除 fadL 后辛...
本研究将基于FRET的葡萄糖和麦芽糖蛋白生物传感器封装到二氧化硅纳米颗粒中，用于代谢物检测。生物传感器由增强青色荧光蛋白（ECFP）与增强黄色荧光蛋白（EYFP）或citrine构成FRET供体-受体对，并夹持相应的周质糖结合蛋白。通过提高pH使正硅酸乙酯（TEOS）水解缩聚，在反相微乳液中形成二氧化硅纳米宿主；蛋白N端六组氨酸（H...
ATP 合酶 ε 亚基对 ATP 的高特异性结合及其结合后显著构象变化，已被用于构建活细胞 ATP 荧光生物传感器。现有基于 ε 亚基的传感器亲和力多在毫摩尔至微摩尔范围，难以监测胞外或低浓度 ATP 信号。本研究对嗜热菌 F1-ATPase（TF1）ε 亚基进行定点突变，获得 R103A/R115A 突变体，并通过荧光滴定和动力学...