Genetically encoded FRET-based biosensor for imaging MMP-9 activity.
本研究开发了一种基因编码的Förster共振能量转移(FRET)生物传感器,用于连续监测基质金属蛋白酶9(MMP-9)的蛋白水解活性。MMP-9是一种胞外分泌型内肽酶,在发育、学习与记忆、癌症转移和卒中等过程中发挥重要作用。要评估该蛋白酶的功能,必须精确测定其活性动力学和亚细胞定位。该传感器无毒,并通过血小板源性生长因子受体跨膜域锚...
本研究开发了一种基因编码的Förster共振能量转移(FRET)生物传感器,用于连续监测基质金属蛋白酶9(MMP-9)的蛋白水解活性。MMP-9是一种胞外分泌型内肽酶,在发育、学习与记忆、癌症转移和卒中等过程中发挥重要作用。要评估该蛋白酶的功能,必须精确测定其活性动力学和亚细胞定位。该传感器无毒,并通过血小板源性生长因子受体跨膜域锚...
本章首先简要介绍荧光与荧光共振能量转移(FRET)的基本原理,随后重点讨论记录FRET最常用的方法,尤其关注广泛用于生物传感器成像的显微镜技术。文中比较了宽场荧光显微镜与激光扫描共聚焦显微镜的仪器选择,说明基于强度(如比率成像、受体光漂白)和基于供体荧光寿命(FLIM)的FRET检测方式,并给出将特定记录方法与具体科学实验相匹配的指...