Clearer view for TIRF and oblique illumination microscopy.
全内反射荧光（TIRF）显微镜利用倏逝场实现薄光学切片，但宽场检测缺乏对离焦模糊的抑制机制，样品散射和远场激发会降低图像对比度。本文提出结构化照明TIRF（sTIRF）和结构化斜照明（sHILO）方法，通过粗干涉条纹填充宽场检测光学传递函数（OTF）的缺失锥，从而拒绝离焦光并保留宽场灵敏度。sTIRF 在临界角以上用两束倏逝场形成干...
Alterations in voltage-sensing of the mitochondrial permeability transition pore in ANT1-deficient cells.
线粒体通透性转换（mPT）孔开放概率与质子电化学梯度大小呈负相关，但赋予该孔电压敏感性的功能模块尚未明确。本研究利用钙离子载体calcimycin或H2O2诱导mPT，在人成纤维细胞（ANT1部分或完全缺失）及ANT1敲低的C2C12肌管中检测mPT的电压感知特性。通过原位线粒体体积测量（thinness ratio和cobalt-...
High-throughput analysis and protein engineering using microcapillary arrays.
本文报道一种多用途技术平台μSCALE（微毛细管单细胞分析与激光提取），可对酵母或细菌表达的数百万蛋白变体进行大规模并行、定量生化与生物物理测量。该平台将单细胞空间分隔于微毛细管阵列中，支持重复成像、细胞生长和蛋白表达。作者利用多种荧光检测，包括结合亲和力测量和动态酶学检测，对细胞及其蛋白产物进行高通量分析。精确的激光提取方法可从微...
A High-Content Assay to Screen for Modulators of EGFR Function.
基于细胞的检测方法能够识别具有细胞通透性的激酶功能调节剂，为依赖纯化重组激酶催化域的传统酶活驱动药物发现提供替代策略。本文描述了一种基于结构域的高内容生物传感器方法，用于研究内源性表皮生长因子受体（EGFR）活性。该方法利用稳定表达绿色荧光蛋白标记的GRB2 Src同源2结构域（GFP-GRB2-SH2）的A549-EGFRB细胞，...