Autophagy induction by IGF1R inhibition with picropodophyllin and linsitinib.
诱导巨自噬（后文简称自噬）可通过促进免疫原性癌细胞死亡及后续免疫识别，改善抗肿瘤治疗结局。作者利用表型发现平台对65000种化合物进行自噬诱导筛选，鉴定出胰岛素样生长因子1受体（IGF1R）抑制剂picropodophyllin（PPP）为强效自噬通量诱导剂。PPP以on-target方式抑制IGF1R酪氨酸激酶活性，并在体外增强受...
High-Content Screening Campaign to Identify Compounds That Inhibit or Disrupt Androgen Receptor-Transcriptional Intermediary Factor 2 Protein-Protein Interactions for the Treatment of Prostate Cancer.
约20%前列腺癌（PCa）患者会进展为不可治愈的去势抵抗性前列腺癌（CRPC），雄激素受体（AR）共激活因子转录中介因子2（TIF2）过表达与不良预后相关。本研究将AR-TIF2蛋白-蛋白相互作用生物传感器（PPIB）高内容筛选（HCS）应用于143,535个化合物，筛选能抑制双氢睾酮（DHT）诱导的AR-TIF2相互作用形成或破坏...
High Content Positional Biosensor Assay to Screen for Compounds that Prevent or Disrupt Androgen Receptor and Transcription Intermediary Factor 2 Protein-Protein Interactions.
转录中介因子2（TIF2）是雄激素受体（AR）的关键共激活因子，参与去势抵抗性前列腺癌（CRPC）的发生与进展。本章报道了一种AR-TIF2蛋白-蛋白相互作用（PPI）生物传感器检测，用于筛选能够诱导AR-TIF2 PPI、抑制二氢睾酮（DHT）诱导的AR-TIF2 PPI形成或破坏已有AR-TIF2 PPI的小分子。该检测采用高内...
Evaluation of Compound Optical Interference in High-Content Screening.
化合物光学干扰是化学筛选中的固有问题，在生化实验中已有较多报道，而在自动化显微成像实验中报道较少。由于成像实验通常包含洗涤和固定步骤，人们曾假设其可消除残留化合物带来的非特异效应。本文分析了一项以增强绿色荧光蛋白（EGFP）为报告基因的功能获得型细胞实验高内容筛选结果，该实验旨在寻找 microRNA（miRNA）生物发生通路的调节...
A High-Content Assay to Screen for Modulators of EGFR Function.
基于细胞的检测方法能够识别具有细胞通透性的激酶功能调节剂，为依赖纯化重组激酶催化域的传统酶活驱动药物发现提供替代策略。本文描述了一种基于结构域的高内容生物传感器方法，用于研究内源性表皮生长因子受体（EGFR）活性。该方法利用稳定表达绿色荧光蛋白标记的GRB2 Src同源2结构域（GFP-GRB2-SH2）的A549-EGFRB细胞，...
High content screening biosensor assay to identify disruptors of p53-hDM2 protein-protein interactions.
本章描述了用于筛选 p53–hDM2 蛋白-蛋白相互作用（PPI）破坏剂的 p53–hDM2 PPI 生物传感器（PPIB）高内容筛选（HCS）方法。作者构建了分别携带 p53–GFP 和 hDM2–RFP 融合蛋白的重组腺病毒表达载体。p53 的 N 端转录激活域包含 hDM2 结合位点，以 GFP 融合蛋白形式表达，并通过核定位...
High-content positional biosensor screening assay for compounds to prevent or disrupt androgen receptor and transcriptional intermediary factor 2 protein-protein interactions.
本文报道了一种用于筛选可预防或破坏雄激素受体（AR）与转录中介因子2（TIF2）蛋白-蛋白相互作用（PPI）的高内容定位生物传感器检测法。重组腺病毒分别表达融合红色荧光蛋白（RFP）的AR配体结合域/激活功能2表面域（含核定位与核输出序列）和融合绿色荧光蛋白（GFP）的TIF2三个LXXLL基序（含HIV Rev核仁定位序列）。未刺...
Characterization and optimization of a novel protein-protein interaction biosensor high-content screening assay to identify disruptors of the interactions between p53 and hDM2.
本文报道一种新型成像型定位生物传感器高内容筛选（HCS）方法，用于鉴定p53-hDM2蛋白-蛋白相互作用（PPI）破坏剂。该生物传感器由嵌合蛋白组成，包含p53和hDM2的N端PPI结构域、核定位序列（NLS）、核输出序列（NES）及荧光报告蛋白。重组腺病毒共感染U-2 OS细胞后，表达p53 N端结构域融合绿色荧光蛋白（GFP）和...
Time-lapse FRET microscopy using fluorescence anisotropy.
本文报道了一种基于荧光各向异性的时间分辨FRET显微成像方法，用于动态监测活T细胞中Rac1活性。作者利用由增强绿荧光蛋白（eGFP）和单体红荧光蛋白（mRFP1）构成的Raichu生物传感器，通过供体-受体间FRET效率变化反映Rac1构象与活性。该传感器被表达于Jurkat T细胞中，细胞表面CD3受体与包被抗CD3抗体的玻璃底...