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Directed evolution of the PobR allosteric transcription factor to generate a biosensor for 4-hydroxymandelic acid.

World journal of microbiology & biotechnology 2022 Liang Y, Luo J, Yang C, Guo S 等 13 人

4-羟基扁桃酸(HMA)广泛用于医药、食品和化妆品。本研究旨在开发基于变构转录因子(aTF)的 HMA 生物传感器。以 HMA 类似物 4-羟基苯甲酸(4HB)响应型 aTF PobR 为模板,通过定向进化改变其配体选择性,获得可响应 HMA 的新型 aTF。利用易错 PCR 和 Megawhop PCR 构建容量约 55 万突变的...

Differential Detection of Bioavailable Mercury and Cadmium Based on a Robust Dual-Sensing Bacterial Biosensor.

Frontiers in microbiology 2022 Hui CY, Guo Y, Li H, Chen YT 等 5 人

基因编程生物传感器已广泛用于监测生物可利用重金属污染及其对生物体的毒性。多数细菌生物传感器最初用于检测汞或镉等特定重金属,但现有传感器难以将镉与其他重金属尤其是汞区分开。本研究以汞响应调节蛋白 MerR 和镉响应调节蛋白 CadR 作为独立传感元件,以增强型绿色荧光蛋白 eGFP 和 mCherry 红色荧光蛋白作为独立报告蛋白,构...

Toehold switch based biosensors for sensing the highly trafficked rosewood

Synthetic and systems biotechnology 2022 Soudier P, Rodriguez Pinzon D, Reif-Trauttmansdorff T, Hijazi H 等 16 人

核酸传感是病原检测、单细胞转录组分析等领域的重要方向,但传统 PCR、测序及其衍生方法在速度、成本、复杂性和特异性方面存在局限。趾突开关(toehold switch)是一类 RNA 传感装置,其合成传感 mRNA 含有被发夹结构遮蔽的核糖体结合位点(RBS)和起始密码子;当目标触发 RNA 与传感序列互补配对时,发夹结构打开,暴露...

Recombinant production of the lantibiotic nisin using Corynebacterium glutamicum in a two-step process.

Microbial cell factories 2022 Weixler D, Berghoff M, Ovchinnikov KV, Reich S 等 11 人

乳链菌肽 nisin 由乳酸乳球菌以无活性前肽形式产生,经翻译后修饰形成五个(甲基)兰硫氨酸环,属于 Ia 类细菌素。前导肽的导出和蛋白酶切割释放活性 nisin。nisin 靶向普遍肽聚糖前体脂质 II,对单核细胞增生李斯特氏菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌等具有重要病原菌具有广谱活性。目前工业 nisin 生产依赖天然生产菌株,产品...

Evolving a Generalist Biosensor for Bicyclic Monoterpenes.

ACS synthetic biology 2022 d'Oelsnitz S, Nguyen V, Alper HS, Ellington AD

原核转录因子可被重新用作精确化学测量与调控的分析及合成工具。单萜是一类在食品、化妆品、香料和医药领域具有重要商业价值的化合物,但因其缺乏发色团且同分异构体难以区分,尤其难以在细胞内快速定量。本文以假单胞菌 Pseudomonas putida 中响应樟脑的 TetR 家族转录调控因子 CamR 为平台,通过定向进化扩展其效应物特异性...