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Real-time detection of protein trafficking with high-throughput flow cytometry (HTFC) and fluorogen-activating protein (FAP) base biosensor.

Current protocols in cytometry 2014 Wu Y, Tapia PH, Jarvik J, Waggoner AS 等 5 人

本研究将荧光激活蛋白(FAP)技术与高通量流式细胞术(HTFC)相结合,用于在活细胞中实时检测蛋白向质膜转运及从质膜回收的过程。该平台可支持转运受体(如G蛋白偶联受体、受体酪氨酸激酶和离子通道)的药物发现,弥补了传统流式细胞术高通量筛选的不足。作者以β2肾上腺素能受体(β2AR)体系验证方法,并扩展至其他G蛋白偶联受体。对约1200...

Fluorogen-activating-proteins as universal affinity biosensors for immunodetection.

Biotechnology and bioengineering 2014 Gallo E, Vasilev KV, Jarvik J

荧光激活蛋白(FAPs)是一类新型荧光生物传感器平台,可用于蛋白质发现。现有 FAP 技术通常要求将 FAP 与目标蛋白进行重组融合,分子操作繁琐,限制了其应用与适应性。本文提出一种基于通用亲和试剂的替代策略,用于蛋白质检测。亲和试剂被工程化为双组分融合蛋白:特异性识别部分来源于 IgG 结合蛋白——金黄色葡萄球菌 Protein ...