Optimised nanobody-based quenchbodies for enhanced protein detection.
淬灭抗体(quenchbody)是标记荧光团的抗体,其荧光强度在结合抗原后增强,在生物传感器开发中具有重要前景。基于纳米抗体的淬灭抗体因体积小、表达容易、稳定性高、可快速进化且易于蛋白工程而尤为吸引人。然而,现有用于蛋白质检测的设计动态范围有限,荧光增强通常仅为1.1–1.4倍。本研究鉴定了纳米抗体互补决定区(CDR)中决定淬灭抗体...
淬灭抗体(quenchbody)是标记荧光团的抗体,其荧光强度在结合抗原后增强,在生物传感器开发中具有重要前景。基于纳米抗体的淬灭抗体因体积小、表达容易、稳定性高、可快速进化且易于蛋白工程而尤为吸引人。然而,现有用于蛋白质检测的设计动态范围有限,荧光增强通常仅为1.1–1.4倍。本研究鉴定了纳米抗体互补决定区(CDR)中决定淬灭抗体...
蛋白-肽相互作用是理解蛋白功能与信号通路的关键。本文报道了一种基于肽模板金纳米团簇(AuNCs)信标的无标记荧光生物传感器策略,用于检测和筛选蛋白。研究发现,目标蛋白可特异性结合肽的末端并形成保护涂层,从而在羧肽酶存在下阻止肽的水解。肽模板AuNCs本身具有强荧光;当模板肽被羧肽酶Y水解时,AuNCs发生氧化并导致荧光猝灭。若存在能...
本文开发了一种基于肽的蛋白检测方法,称为“识别诱导共价捕获与标记”(RCCL)。当肽探针与目标蛋白结合后,可在电化学控制和金属催化下诱导肽与目标蛋白之间的氧化交联。具体而言,肽与目标蛋白通过二者酪氨酸基团之间形成二酪氨酸而交联;同时,以这种方式形成的二酪氨酸还可提供荧光信号读出。因此,该方法对每种目标蛋白仅需一种探针,初始非共价分子...
背景:具有生物相容性官能团和良好荧光行为的荧光染料可用作生物传感器,用于监测不同生物过程及蛋白检测。已有荧光传感器虽具较高选择性和灵敏度,但仍需开发具有更好荧光性能和生物相容性的新荧光团。结果:以2-苯乙腈、2-氯嘧啶和2-甲氧基苯酚为起始原料,经多步合成得到新型4,4'-(1,1'-(5-(2-甲氧基苯氧基)-[2,2'-双嘧啶]...
本文设计并合成了阳离子和阴离子聚芴乙烯基-苯并噻二唑共聚物(PFEBT),用于蛋白质的荧光开启检测。由于激发态具有电荷转移特征,PFEBT在水溶液中荧光很弱,但聚合物聚集可增强其黄色荧光。与蛋白结合时,PFEBT表现出荧光增强而非猝灭。静电作用和疏水作用均可促进PFEBT/蛋白复合物形成并提高荧光,增强程度取决于聚合物和蛋白性质。通...
本文报道了用于蛋白分析物波长比率生物传感的肽基荧光构建体的设计、合成与功能评价。该概念以18个氨基酸肽 pTMVP 与重组抗体片段 Fab57P 之间的高亲和力模型相互作用展示。pTMVP 在两个不同位点用 6-溴甲基-2-(2-呋喃基)-3-羟基色酮(BMFC)功能化,该荧光团为环境敏感型并具有双带发射。标记后 pTMVP 与 F...