Phosphorylation-Mediated Assembly of a Semisynthetic Fluorescent Protein for Label-Free Detection of Protein Kinase Activity.

Analytical chemistry 2015 Yin C, Wang M, Lei C, Wang Z 等 10 人

蛋白磷酸化由蛋白激酶催化，在细胞内信号转导、代谢、基因表达和免疫应答等过程中起关键作用，因此检测激酶活性对生化研究和药物发现具有重要意义。本文开发了一种基于半合成绿色荧光蛋白（GFP）磷酸化介导组装的新型荧光生物传感器，用于无标记检测蛋白激酶活性。作者合成了由GFP第10条β链（s10）与激酶底物肽组成的嵌合肽S-peptide。蛋...

荧光生物传感器 蛋白激酶蛋白磷酸酶半合成绿色荧光蛋白磷酸化

High-affinity bisubstrate probe for fluorescence anisotropy binding/displacement assays with protein kinases PKA and ROCK.

Analytical biochemistry 2009 Vaasa A, Viil I, Enkvist E, Viht K 等 7 人

本文报道了一种高亲和力双底物荧光探针ARC-583（Adc-Ahx-(D-Arg)6-D-Lys(5-TAMRA)-NH2），并描述了其在荧光偏振/各向异性结合与置换实验中的应用，用于表征cAMP依赖性蛋白激酶PKA和Rho激酶ROCK的ATP竞争性抑制剂及蛋白/肽底物竞争性抑制剂。该探针与PKA的结合解离常数为0.48 nM，因而...

荧光生物传感器 荧光各向异性蛋白激酶双底物探针PKA