A simple approach for measuring FRET in fluorescent biosensors using two-photon microscopy.
遗传编码的荧光蛋白(FP)生物传感器可用于监测活细胞和组织中的细胞事件。由于多数探针最初针对单光子激发设计,其宽双光子激发(2PE)截面和尚未充分理解的漂白特性,使双光子激光扫描显微镜(TPLSM)应用困难。本文提出一种简化FRET型荧光生物传感器在TPLSM中使用的方案。首先利用活细胞中表达的FRET标准蛋白评估并优化TPLSM系...