蛋白激酶A（PKA）调控细胞周期等多种细胞过程。本研究利用遗传编码的FRET生物传感器，基于AKAR衍生的AKAREV探针，在活HeLa细胞中以单细胞水平表征有丝分裂过程中PKA活性。结果显示，HeLa细胞进入中期后PKA活性显著升高，并维持至胞质分裂/末期结束。采用AKAREV T>A失活突变体和H89抑制剂验证了所测PKA活性的...
细胞机械微环境对细胞功能具有重要影响，基质刚度可指导干细胞分化，但其机制尚不清楚。本文报道，在人源间充质干细胞（HMSCs）中，基质刚度可调节细胞对β-肾上腺素受体（β-AR）激动剂异丙肾上腺素（ISO）的反应。基于荧光共振能量转移（FRET）的A激酶活性报告蛋白（AKAR2）显示，软基质上ISO诱导的蛋白激酶A（PKA）活性较低，...
本文报道了一种基于DNA诱导金纳米颗粒（AuNPs）聚合物网络阻断信号放大的高灵敏电化学生物传感器，用于蛋白激酶活性检测与抑制分析。该策略中，偶联DNA1的金纳米颗粒通过Zr4+与磷酸化肽结合，并由cDNA分别与DNA1两侧序列及DNA2杂交，组装成DNA-AuNPs聚合物网络块。激酶活性通过静电吸附在该网络块上的[Ru(NH3)6...
本文报道了一种用于激酶活性检测的新型无标记生物传感器。该传感器以激酶响应型聚合物水凝胶为核心，将带负电的苯乙烯胶体粒子自组装形成的结晶胶体阵列（CCA）嵌入水凝胶网络中。当水凝胶中固定的靶肽被激酶磷酸化后，凝胶内固定负电荷增加，产生Donnan电势并引起水凝胶可逆溶胀，使CCA晶格间距增大，导致可见光衍射峰发生红移。通过反射光谱测量...
本文报道了一种基于酶功能化金纳米粒子多功能纳米探针的电化学发光（ECL）生物传感器，用于高灵敏监测蛋白激酶活性及其抑制。该传感器以金电极为工作电极，表面自组装半胱氨酸终止肽并用硫醇己醇封闭；蛋白激酶A（PKA）与ATP孵育后催化肽磷酸化，生物素化抗磷酸丝氨酸抗体识别磷酸丝氨酸，亲和素桥接GOx/Au NPs/DNA-biotin纳米...
环磷酸腺苷（cAMP）和cAMP依赖性蛋白激酶A（PKA）调控几乎所有真核细胞中的多种细胞功能。在神经元中，cAMP/PKA信号级联控制轴突生长、路径寻找、突触传递效能、兴奋性调节及长期变化等生物学特性。针对cAMP或PKA的基因编码光学生物传感器通过在活神经元中提供实时测量，显著加深了人们对这些过程的理解。本综述描述了cAMP或P...
蛋白激酶A（PKA）广泛存在于动物界，在神经系统中作为激酶效应器整合多种神经调质的细胞效应。近年来发展的荧光共振能量转移（FRET）生物传感器，如AKAR，使活细胞中PKA激活的直接测量成为可能：只需在CFP激发下测量CFP与YFP发射波长的荧光比值。该方法可在细胞甚至亚细胞水平提供秒级时间分辨率的数据，为理解时空信号整合开辟新途径...