本文报道了一种基于还原氧化石墨烯-聚多巴胺-银纳米颗粒-Ti4+（rGO-PDA-AgNPs-Ti4+）纳米复合材料的新型电化学生物传感方法，用于检测蛋白激酶A（PKA）活性。该复合材料兼具磷酸肽识别与电化学信号读出功能。首先通过多巴胺自聚合制备聚多巴胺修饰还原氧化石墨烯（rGO-PDA）；随后银离子被吸附到聚多巴胺（PDA）层并被...
视网膜中光诱导的突触外多巴胺释放可降低视杆细胞内环磷酸腺苷（cAMP）水平，并介导光依赖性脱敏，但视杆细胞 cAMP 动态的精细时间过程因技术困难而难以解析。本研究利用表达 FRET 型蛋白激酶 A（PKA）活性生物传感器 AKAR3EV 的 PKAchu 小鼠，通过双光子活体成像观察离体视网膜中 PKA 的时空调控。除已知的开光诱...
细胞内信号保真度依赖于动态活性结构的组织。空间区室化曾被提出用于解释多种G蛋白偶联受体如何在共用第二信使环磷酸腺苷（cAMP）的情况下实现特异性，但限制该可扩散信使空间分布的机制长期不明。本文揭示cAMP依赖性蛋白激酶A（PKA）I型调节亚基RIa可随cAMP信号动态发生液-液相分离（LLPS），形成富含cAMP和PKA活性的生物分...
本文报道了一种基于石墨相氮化碳纳米颗粒（g-C3N4）修饰碳化钛（Ti3C2）MXene 纳米片的高灵敏电化学发光（ECL）方法，用于蛋白激酶活性检测与抑制剂筛选。该策略将 kemptide 底物肽固定于金电极表面，并以蛋白激酶 A（PKA）为模型酶进行磷酸化。g-C3N4-MXene 探针可基于磷酸基团与 MXene 中富集 Ti...
多能基质细胞（MSC）表现出显著的功能异质性，但其分子机制仍不清楚。本研究利用遗传编码生物传感器 PKA-Spark，在单细胞水平探索 MSC 对激活 Gs 蛋白/环磷酸腺苷（cAMP）/蛋白激酶 A（PKA）依赖信号通路的激素的响应。PKA-Spark 在 PKA 磷酸化后形成荧光聚集体，可用于活细胞实时成像。研究首次证明，约半数...
蛋白激酶A（PKA）以四聚体全酶形式存在，在 cAMP 升高时被激活，并在心脏生理、神经元发育和脂肪细胞功能等过程中发挥重要作用。尽管该激酶已被用于多种生物传感器设计，但尚未报道性能可与 Förster 共振能量转移（FRET）报告蛋白相当的单荧光团报告蛋白。本研究基于 PKA 底物识别中的静电相互作用和核定位序列（NLS）基序，设...
基于 Förster 共振能量转移（FRET）的基因编码生物传感器已被用于可视化信号分子活性。目前大多数传感器由青色荧光蛋白和黄色荧光蛋白（CFP/YFP）组成，限制了在单个细胞内同时使用多种 FRET 传感器，且与蓝光驱动的光遗传工具不兼容。为克服这些问题，作者开发了具有红移激发和发射波长的 FRET 生物传感器。通过计算 För...
蛋白激酶活性异常与糖尿病、心血管疾病、阿尔茨海默病和癌症等多种疾病相关，因此其活性检测对临床诊断和靶向治疗具有重要意义。本文报道了一种基于底物肽的电化学生物传感器，用于超灵敏检测蛋白激酶活性，并采用可逆加成-断裂链转移（RAFT）聚合作为信号放大策略。首先，Cys 末端底物肽通过 Au-S 自组装固定于金电极表面；在 ATP 存在下...