蛋白酶在凋亡、炎症和病毒蛋白成熟等过程中发挥关键作用，但现有蛋白酶生物传感器难以从低水平内源蛋白酶获得可靠信号。本研究基于 Oplophorus gracilirostris NanoLuc 荧光素酶开发了高灵敏蛋白酶生物传感器 FlipNanoLuc。该传感器将 NanoLuc 拆分为 LgBiT（β1–8）、β9 和 HiBiT...
本文提出一种将均相检测转化为表面固定电化学分析的蛋白酶检测新策略。以四聚体蛋白链霉亲和素（SA）为传感单元，基于 SA–生物素偶联化学构建传感平台；以 Caspase-3 为模型分析物，设计序列为 biotin–GDEVDGK–biotin 的生物素化肽作为底物。该肽底物可通过 SA–生物素相互作用诱导 SA 组装，形成 (SA–b...
测量活细胞或生物体内的蛋白酶活性仍具挑战性。本文报道一种转基因编码生物传感器，可高灵敏、高特异报告炎症小体激活过程中 caspase-1 及其他蛋白酶的蛋白水解活性。该蛋白酶报告系统基于前体白介素-1β（pro-IL-1β）与 Gaussia 荧光素酶（GLuc）融合蛋白 iGLuc 的生物学特性：pro-IL-1β 依赖性的蛋白聚...
荧光抗体蛋白（IgG）通过特异性结合共价固定在集成光学玻璃波导芯片表面的半抗原，被用作蛋白酶活性的测量底物。将芯片暴露于蛋白酶时，结合的荧光抗体分子被消化，倏逝场中可检测荧光按比例下降。该结合荧光抗体蛋白作为独特的通用蛋白酶底物，其生物活性与荧光信号共同构成测量基础。蛋白酶作用以实时模式监测，记录倏逝荧光的逐渐下降。芯片可通过过量胃...
生物发光共振能量转移（BRET）系统长期以蓝绿色 Renilla 荧光素酶（Rluc）为供体，但其底物苯基海鞘素昂贵且生化性质不利，限制应用。本文报道一系列基于利用 D-荧光素（D-luciferin）的荧光素酶的新型 BRET 供体-受体对，具有红移光子输出、更优生化性质和更高效率。作者建立改进的 Förster 方程预测最佳 B...