钙调蛋白（CaM）是 Ca2+ 感受蛋白，参与多种血管平滑肌细胞（VSMC）功能。由于 CaM 表达量不足以覆盖其众多靶蛋白，调控其表达及靶蛋白相互作用的因子可广泛影响血管功能。VSMC 接受内皮细胞（EC）的多种调控，但 EC 是否通过控制 VSMC 中 CaM 表达及相互作用调节血管功能尚不清楚。本研究使用同一血管分离的 EC ...
心血管疾病是全球主要死因，动脉阻塞常未被及时发现。植入式医疗器械如支架和人工血管可再通血管，但长期后仍可能再狭窄。本文开发一种可报告细胞数量并可安装于支架或人工血管进行远程监测的血管生物传感器。该器件基于微加工互指电极（IDEs），既能通过阻抗检测血管平滑肌细胞贴附与数量变化，又能接收电流诱导受控细胞死亡即凋亡。作者证明该器件具有可...
细胞在外部应力下通过细胞稳态（allostasis）改变形态、代谢与功能，以机械方式适应动态局部环境。为探索细胞稳态中的机械转导，作者构建了集成微机械系统，将超声镊子机械刺激器与基于 Förster 共振能量转移（FRET）的分子力生物传感器 actinin-sstFRET 结合，实时原位监测瞬态刺激下单细胞机械稳态。超声镊子利用 ...
钙离子-转录偶联控制血管平滑肌细胞（VSMC）表型相关基因表达，使正常收缩型VSMC在血管损伤后转为增殖型，参与修复并促进血管重塑、动脉粥样硬化和再狭窄。本文证明，对Ca2+和HCO3−敏感的可溶性腺苷酸环化酶（sAC）将人冠状动脉平滑肌细胞（hCASMCs）中的Ca2+内流与cAMP生成及CREB磷酸化联系起来。表达FRET型cA...
本研究从白细胞介素-1β（IL-1β）诱导转分化的血管平滑肌细胞（VSMC）中克隆出一组四个腺苷酸环化酶（AC）剪接变体，其编码 AC8 的短形式，命名为 AC8E-H。作者利用 FRET 型 cAMP 生物传感器成像和生化方法证明，AC8E-H 亚型不具有环化酶活性，而是通过与其它全长 AC 形成异源二聚体，阻碍功能单位向质膜转运...
钙通透性储控通道（SOCs）介导钙内流，参与血管平滑肌细胞收缩、生长和增殖等过程。典型SOCs由Orai1蛋白组成，并受内质网/肌浆网钙库传感器STIM1激活。TRPC1是否形成SOCs以及Orai1是否参与其激活仍存在争议。作者近期发现，收缩型血管平滑肌细胞中TRPC1基SOCs的激活涉及钙库耗竭诱导STIM1介导的Gαq/PLC...
在血管平滑肌细胞（VSMCs）中，TRPC1 基 store-operated 通道（SOCs）介导 Ca2+ 内流，调节收缩、增殖和迁移。TRPC1 基 SOCs 的激活需要 Gαq/PLCβ1 活性和 PKC 磷酸化，但钙库耗竭如何启动该门控通路尚不清楚。本研究聚焦内质网/肌浆网钙传感器 STIM1。野生型 VSMCs 中，st...
肌浆网（SR）钙库耗竭可激活血管平滑肌细胞（VSMCs）中由经典瞬时受体电位（TRPC）1蛋白组成的储控通道（SOCs），并参与重要细胞功能。此前研究证明蛋白激酶C（PKC）是VSMCs中TRPC1 SOC激活所必需的，本研究进一步考察经典磷脂酰肌醇信号通路中Gq介导的磷脂酶C（PLC）活性是否驱动PKC依赖性通道门控。G蛋白抑制剂...
动脉粥样硬化发展与内膜细胞形态变化相关，可导致血管平滑肌细胞（VSMCs）出现星状细胞表型。本研究旨在确定动脉粥样硬化斑块中关键促动脉粥样硬化细胞因子（IL-1β、TNFα 和 IFNγ）是否能诱导该表型，因为这些分子已知可触发 VSMCs 转分化。结果显示，在所测试的主要炎症介质中，只有 IL-1β 能在 VSMCs 中诱导星状形...
cGMP依赖性蛋白激酶I（PKGI）在调控血管平滑肌细胞（SMC）表型中起重要作用，但其核定位机制及核内功能仍不清楚。本研究表征了PKGIγ——一种经蛋白水解产生的PKGI激酶片段——中的核定位信号（NLS）。利用表达野生型和NLS突变型PKGIγ的细胞、小分子核转运抑制剂以及免疫定位实验，发现PKGIγ含有组成型活性NLS，其核区...
在哺乳动物细胞中实时、非侵入地成像胞内第二信使，同时保持其体内表型，需要结构精密的生物传感器。本文提供了在主动脉血管平滑肌细胞中使用单波长cGMP生物传感器δ-FlincG的方法学。δ-FlincG由含两个cGMP结合域的蛋白激酶GIα（PKGIα）调节域片段与环状置换EGFP（cpEGFP）融合而成，cGMP结合引起荧光强度变化，...
膜电位是决定血管张力的关键因素，多种血管舒张剂通过调节离子通道电流发挥作用。血管平滑肌细胞表达多种腺苷酸环化酶（AC）同工酶，但其在血管舒张信号中的功能冗余机制不明。本研究通过选择性短干扰RNA（siRNA）转染培养血管平滑肌细胞，使AC3、AC5和AC6表达降低超过75%，并检测β-肾上腺素受体（β-AR）刺激后的cAMP积累、蛋...