Capture-SELEX for a short aptamer for label-free detection of salicylic acid.
水杨酸(SA)是阿司匹林的水解产物和活性形式,广泛存在于多种水果及其他食品中,食品与药物分析领域对其检测需求强烈。由于 SA 是小分子,适配体相比抗体更具优势。本研究采用文库固定化捕获-SELEX 方法筛选 SA 适配体。经 17 轮筛选,获得两个主要适配体家族。其中家族 1 的 SA1 适配体在硫黄素 T(ThT)荧光法中 Kd ...
水杨酸(SA)是阿司匹林的水解产物和活性形式,广泛存在于多种水果及其他食品中,食品与药物分析领域对其检测需求强烈。由于 SA 是小分子,适配体相比抗体更具优势。本研究采用文库固定化捕获-SELEX 方法筛选 SA 适配体。经 17 轮筛选,获得两个主要适配体家族。其中家族 1 的 SA1 适配体在硫黄素 T(ThT)荧光法中 Kd ...
小分子或蛋白质与 RNA/DNA 的相互作用常伴随核酸折叠和结构变化,对其生物物理表征有助于理解分子机制。本文提出 kinFRET(动力学 Förster 共振能量转移),一种实时整体 FRET 方法,用于测量结合与折叠动力学。kinFRET 基于 switchSENSE 生物传感技术,利用荧光标记的表面固定 DNA 连接链,在芯片...
急性心肌梗死(AMI)是冠状动脉突发阻塞导致的危及生命疾病。心肌肌钙蛋白 I(cTnI)是最具特异性的生物标志物,通常单独检测以诊断或排除 AMI,因此准确检测 cTnI 对患者生命健康具有重要意义。与其他方法相比,荧光检测具有操作简便、灵敏度高和适用性广等优点。然而,由于体液中生物分子存在强荧光干扰,往往难以获得高灵敏度。为解决该...
CRISPR/Cas系统因侧切活性成为分子生物传感工具,但直接用于原位细胞内检测仍具挑战。本文首次提出CRISPR/Cas辅助纳米针传感器nanoCRISPR,用于活细胞内ATP检测。该传感器采用两步过程:先在细胞质中呈现与纳米针连接的适配体锁定Cas12a激活子,ATP识别事件使固定在纳米针上的激活子解锁;随后将纳米针从细胞取出,...
本研究旨在开发并测试一种用于检测伊拉克献血者血样中放射性氡气和铅离子的生物传感器。该传感器由适配体、醋酸、孔雀石绿和TRIS-HAC组成,结果用荧光分光光度计测量。研究发现血中222Rn在不同个体间存在差异,男性和吸烟者水平较高,最高浓度出现在一名男性癌症患者中。用于检测血中222Rn的传感器有效、灵敏且成本低,检测水平在WHO限值...
本研究构建了一种高通量基于细胞的监测平台,用于快速测定未知水样的特异性毒性,其核心是基于适配体修饰金纳米颗粒(AuNPs@aptamer)的荧光生物检测。该平台利用适配体捕获毒性指示物,并通过 DNA 杂交链式反应(HCR)诱导 DNA 功能化金纳米颗粒自组装实现信号放大,从而灵敏测定目标化合物引起的亚致死效应。所合成 DNA 纳米...
CRISPR/Cas12a 因具有反式切割活性,已成为新型 DNA 生物传感器开发的关键技术。尽管其在核酸检测中表现突出,但面向非核酸靶标、尤其是皮摩尔以下浓度的通用 CRISPR/Cas 传感系统仍具挑战。DNA 适配体可通过构象变化高亲和、高特异性地结合蛋白、小分子和细胞等靶标。本文利用适配体的多样结合能力,并将 Cas12a ...
适配体受体是生物传感器的重要识别元件,但小分子适配体的获得高度依赖靶标结构。作者分析了27个靶标–适配体对中单个功能团对结合与筛选结果的贡献,发现空间受阻功能团之间可出现负协同,从而降低适配体筛选成功率。针对亮氨酸和伏立康唑等此前多次筛选失败的重要小分子,作者提出功能团引导的定制筛选策略:通过比较类似物靶标的表观解离常数与置换自由能...
使用 SYBR Green I(SGI)和硫黄素 T(ThT)等 DNA 染色染料进行适配体结合的无标记检测,长期以来被用于结合实验和生物传感器开发。由于这些染料多为阳离子,可吸附到反应容器壁,导致荧光信号不稳定甚至造成结果误判。本研究首先利用 ThT 与经典腺苷适配体评估信号稳定性。在聚苯乙烯微孔板中,即使加入非结合靶标或水也观察...
β-乳球蛋白(β-Lg)是牛奶中可引发皮疹、呕吐、腹泻等严重过敏反应的重要蛋白,因此开发高灵敏检测方法对保护过敏人群具有重要意义。本文报道了一种基于二硫化钨(WS2)纳米片和 DNase I 辅助信号放大的新型高灵敏荧光适配体生物传感器,用于检测 β-Lg。首先,荧光素类染料(FAM)标记的 β-Lg 适配体通过范德华力吸附于 WS...
草甘膦(GLYP)是一种广谱、非选择性有机膦除草剂,广泛用于多种食品和非食品作物。本文开发了一种基于适配体和实时荧光定量 PCR(qPCR)的荧光生物传感器(Mbs@dsDNA):先以羧基修饰磁性微球与氨基化 polyA 孵育,再与 polyT-草甘膦适配体及互补 DNA 杂交固定。当 Mbs@dsDNA 上的草甘膦适配体特异性识别...
四环素(Tetracycline, TET)是动物治疗中常用的广谱抗生素,食品中 TET 残留会威胁人类健康,因此需要高效分析方法用于食品质量评价。本研究建立了一种基于特异性适配体模板银纳米团簇(AgNCs)的无标记荧光生物传感器,用于检测 TET。利用对 TET 具有高特异性结合能力的适配体合成新型 DNA 模板 AgNCs(DN...
尿酸(UA)是人体内嘌呤代谢的终产物,也是多种疾病的重要生物标志物。此前为检测尿酸而筛选出一种尿酸结合适配体,但该适配体需要多个Mg2+离子才能结合;其有效结合需在约100 mM Mg2+下实现,而在生理条件下结合明显减弱。本研究采用交替更换Na+/Mg2+缓冲液的“盐切换”捕获筛选策略,经12轮筛选获得新的尿酸结合适配体SSV12...