非洲猪瘟（ASF）是由非洲猪瘟病毒（ASFV）引起的高致死性猪传染病，对养猪业和全球经济造成严重威胁。本研究建立了一种将多重交叉置换扩增（MCDA）与纳米颗粒侧流生物传感器（LFB）相结合的 ASFV-MCDA-LFB 检测体系，用于 ASFV 的早期快速鉴定。首先设计一组 MCDA 引物，识别 ASFV B646L 靶基因的 10...
非洲猪瘟病毒（ASFV）传染性强且致死率高达100%，已在全球造成重大经济损失。本文开发了一种级联比色检测方法，将CRISPR/Cas14a系统、G-四链体DNA酶（G4 DNAzyme）与微流控纸基分析装置（μPAD）相结合，用于ASFV核酸检测。该方法先通过PCR扩增ASFV双链DNA，并利用T7外切酶选择性生成目标单链DNA；...
非洲猪瘟病毒（ASFV）是一种大型复杂DNA病毒，其主要衣壳蛋白p72构成病毒最外层二十面体衣壳。本研究通过噬菌体展示技术从骆驼免疫VHH库中筛选抗ASFV p72蛋白的纳米抗体。根据互补决定区（CDR）序列，共鉴定出9个不同纳米抗体，并含有框架区2（FR2）典型氨基酸替换。其中6个在大肠杆菌中成功表达，并评估其对p72的特异性和亲...
非洲猪瘟病毒（ASFV）传播造成巨大经济损失，早期检测尤为重要。本文建立了一种基于碳纳米点（CNDs）和环介导等温扩增（LAMP）的荧光生物传感器，用于超灵敏检测ASFV。LAMP在62 ℃等温条件下高效扩增ASFV P72基因，短时间内产生大量焦磷酸（PPi），使反应体系pH下降。所合成CNDs光稳定性好，在550 nm激发下于5...
非洲猪瘟病毒（ASFV）的早期诊断是防控非洲猪瘟的关键。本文开发了一种基于直接聚合酶链式反应（direct PCR）结合CRISPR/Cas12a系统的荧光生物传感器和侧流层析试纸条（LFA strip），用于ASFV检测。直接PCR可在不牺牲灵敏度的同时完成样品裂解与核酸扩增，从而省去核酸提取步骤。CRISPR/Cas12a系统通...
由严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）引发的2019冠状病毒病（COVID-19）疫情引发了重大公共卫生关注。快速、经济、准确的核酸检测不仅有助于疾病治疗，也对传染病防控至关重要。本文提出并开发了一种基于一锅法CRISPR/Cas13a的可视化生物传感器，用于快速、低成本核酸检测。该方法将Cas13a切割反应与重组酶...
非洲猪瘟病毒（ASFV）等跨境病原体仍对公共卫生和食品安全构成严重社会经济威胁，亟需更廉价、快速且准确的诊断方法。近年来，CRISPR 系统的发展使基于 Cas13 和 Cas12/14 的核酸检测成为可能，这些系统可通过识别靶标核酸并副切割单链 DNA 报告子来报告靶标存在。现有方法多依赖荧光标记报告子和昂贵仪器，存在读数复杂、背...
非洲猪瘟（ASF）病毒是一种引起猪严重出血性高热、致死率极高的双链 DNA 病毒，目前尚无有效疫苗，快速检测对疫情控制至关重要。本文报道了一种用于检测猪血中非洲猪瘟病毒（ASFV）DNA 的生物传感器方法。该传感器以含 7 个锁定核酸（LNA）取代的 25-mer 单链 DNA/LNA 嵌合探针作为识别元件，靶向 ASFV vp72...