布鲁氏菌病是由布鲁氏菌属引起的慢性人畜共患传染病，其中羊布鲁氏菌毒力最强。本研究报道了一种“一锅法”检测方案，用于从布鲁氏菌属中鉴定羊布鲁氏菌。该方案将多重交叉置换扩增（MCDA）与 dUTP 辅助尿嘧啶-DNA 糖基化酶（UDGase）及金纳米颗粒侧流层析试纸条（AuNPs-LFA）生物传感器相结合，命名为 mMCUDA。研究设计...
非洲猪瘟（ASF）是由非洲猪瘟病毒（ASFV）引起的高致死性猪传染病，对养猪业和全球经济造成严重威胁。本研究建立了一种将多重交叉置换扩增（MCDA）与纳米颗粒侧流生物传感器（LFB）相结合的 ASFV-MCDA-LFB 检测体系，用于 ASFV 的早期快速鉴定。首先设计一组 MCDA 引物，识别 ASFV B646L 靶基因的 10...
幽门螺杆菌（H. pylori, HP）是全球分布最广的细菌之一，也是多种胃十二指肠疾病的主要致病因子，亟需快速、灵敏的诊断方法。本研究建立了一种将多重交叉置换扩增（MCDA）与纳米颗粒侧流层析生物传感器（LFB）相结合的新诊断方法，命名为HP-MCDA-LFB，用于快速灵敏检测幽门螺杆菌。整个检测流程包括DNA模板提取（约15 m...
肺炎支原体是社区获得性肺炎的重要病原体，主要影响儿童和青少年。本研究建立了一种将多重交叉置换扩增（MCDA）与实时荧光技术相结合的肺炎支原体快速检测方法。针对肺炎支原体设计了一组10条特异性引物，用于实时荧光MCDA反应。其中一条引物整合了限制性内切酶识别序列、荧光基团和淬灭基团，从而实现实时荧光检测。实时MCDA反应在简单实时荧光...
世界卫生组织推荐用于结核分枝杆菌（MTB）检测的核酸检测方法有望提高结核病报告的准确性。本研究开发了一种将实时（rt）荧光技术与多重交叉置换扩增（MCDA）相结合的新方法，用于快速、敏感、特异性检测MTB，称为MTB-rt-MCDA。依据rt-MCDA原理，设计了10条引物用于MCDA反应，其中一条引物被工程化引入限制性内切酶识别位...
化脓性链球菌（Streptococcus pyogenes）是引起咽炎的主要病原体，还可诱发坏死性筋膜炎和链球菌中毒性休克综合征（STSS），病死率较高，因此快速识别并治疗该菌感染对防止病情恶化至关重要。本研究采用新开发的多重交叉置换扩增（MCDA）技术，靶向 speB 基因，在 63 °C 下 30 min 内检测化脓性链球菌；随...
爱泼斯坦-巴尔病毒（EBV）与鼻咽癌密切相关，血浆 EBV DNA 检测可用于鼻咽癌早筛、预后及疗效监测。本文建立了一种名为 EBV-MCDA-LFB 的分子诊断方法，将多重交叉置换扩增（MCDA）与纳米颗粒侧流层析生物传感器（LFB）相结合，用于快速、简便、特异性检测 EBV。该方法设计 10 条引物，靶向 EBV 基因组高度保守...
埃普斯坦-巴尔病毒（EBV）是一种双链DNA疱疹病毒，可感染超过95%的健康成人，并与传染性单核细胞增多症及多种恶性肿瘤相关。本研究建立了一种改良多重交叉置换扩增（MCDA）联合金纳米颗粒侧流层析生物传感器（AuNPs-LFB）的EBV检测方法（EBV-MCDA-LFB）。针对EBNA-LP基因设计10条MCDA引物，其中CP1*引...
柯萨奇病毒A16（CVA16）是手足口病（HFMD）的主要病原体之一，尤其威胁亚太地区婴幼儿健康；由于目前缺乏疫苗和有效抗病毒药物，快速早期识别对防控至关重要。本研究建立了一种基于侧流层析生物传感器（LFB）和逆转录多重交叉置换扩增（RT-MCDA）的CVA16检测方法。针对CVA16 VP1基因高度保守区设计10条引物，在等温扩增...
牛流产布鲁氏菌（Brucella abortus）是牛布鲁氏菌病的重要病原体，亟需超灵敏且高特异的鉴定技术。本研究建立多重交叉置换扩增（MCDA）结合金纳米颗粒侧流生物传感器（AuNPs-LFB）靶向BruAb2_0168基因的检测方案（B. abortus-MCDA-LFB）。依据MCDA机制设计10条引物，C1引物5′端标记FA...
志贺氏菌是引起细菌性痢疾的主要病原体，其中志贺氏菌 S. sonnei 在发达地区最常见，在未发达地区居第二位。本研究建立多重交叉置换扩增（MCDA）联合侧流层析生物传感器（LFB）方法，用于检测携带 ipaH 和 wbgX 基因的致病性 S. sonnei 菌株。多重 MCDA-LFB 在 63°C 恒温纯培养条件下，30 min...
流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae）是机会致病菌，常引起儿童菌血症、脑膜炎和肺炎。本文开发了一种基于多重交叉置换扩增（MCDA）和实时荧光技术的快速检测方法。研究设计了10条引物用于H. influenzae实时MCDA反应，并按实时MCDA原理将核心引物修饰上限制性内切酶识别序列、荧光基团和淬灭基团。反应在...
由脑膜炎奈瑟菌（Neisseria meningitidis）引起的脑膜炎球菌病仍是全球重大公共卫生问题，A、B、C和W135为主要致病血清群，及时检测并区分这些血清群至关重要。本研究建立了多重交叉置换扩增-侧流层析生物传感器（MCDA-LFB）检测体系，分别靶向ctrA、sacB、siaD、siaD和synG基因，用于检测脑膜炎奈...
伯克霍尔德菌（Burkholderia pseudomallei）是高致病性病原菌，可引起类鼻疽，在多个热带发展中国家构成重要公共卫生问题。本研究提出并验证了一种新型检测方法——多重交叉置换扩增联合纳米颗粒侧流生物传感器（MCDA-NB），用于鉴定伯克霍尔德菌并诊断类鼻疽。B. pseudomallei-MCDA 针对III型分泌系...
嗜肺军团菌（Legionella pneumophila）是重要的机会性水传播病原体，可引起严重呼吸道疾病军团病。多重交叉置换扩增（MCDA）是一种等温核酸扩增技术，已用于多种细菌病原体的快速检测。本研究开发了一种将 MCDA 与纳米颗粒基侧流生物传感器（LFB）联用的 MCDA-LFB 方法，用于快速检测 L. pneumophi...
背景：结核病（TB）是由结核分枝杆菌复合群（MTBC）引起的严重慢性传染病，因此开发新型、简便、快速且灵敏的MTBC检测方法对结核病防治具有重要意义。结果：本研究建立了多重交叉置换扩增（MCDA）联合纳米颗粒侧流层析生物传感器（LFB）同时检测MTBC两个靶基因（IS6110和mpb64）的方法（MCDA-LFB）。针对IS6110...
热带念珠菌（Candida tropicalis）是日益重要的机会致病真菌，可引起危及生命的侵袭性念珠菌病。传统培养鉴定需3–7天，难以满足快速诊断需求。本研究建立多重交叉置换扩增（MCDA）联合纳米颗粒侧流层析生物传感器（LFB）检测热带念珠菌。MCDA体系设计10个引物靶向热带念珠菌ITS II基因，在等温扩增仪中扩增；扩增产物...
烟曲霉（Aspergillus fumigatus）是一种机会性、广泛分布的腐生霉菌，可侵犯人体肺、鼻、眼、脑和骨骼，尤其易导致免疫抑制患者感染，但快速诊断困难。本文建立多重交叉置换扩增（MCDA）联合纳米颗粒侧流生物传感器（LFB）的 MCDA-LFB 方法，用于快速、可靠、简便地检测烟曲霉。研究针对烟曲霉特异性 annexin ...
2019冠状病毒病（COVID-19）由SARS-CoV-2引起并引发全球大流行。本文将多重交叉置换扩增（MCDA）与CRISPR-Cas12a检测结合，开发新型诊断方法MCCD，用于SARS-CoV-2检测。该方法先对RNA模板进行逆转录MCDA（RT-MCDA），再由CRISPR-Cas12a/CrRNA复合物识别预定义靶序列，...
无乳链球菌（Streptococcus agalactiae, S. agalactiae）是引起新生儿肺炎、败血症和脑膜炎的重要病原体，母体肛周-阴道定植是垂直传播的关键风险。本研究建立了一种基于多重交叉置换扩增（MCDA）联合纳米颗粒侧流生物传感器（LFB）的快速、准确、灵敏检测方法。针对 S. agalactiae 特异性 g...