世界卫生组织推荐用于结核分枝杆菌（MTB）检测的核酸检测方法有望提高结核病报告的准确性。本研究开发了一种将实时（rt）荧光技术与多重交叉置换扩增（MCDA）相结合的新方法，用于快速、敏感、特异性检测MTB，称为MTB-rt-MCDA。依据rt-MCDA原理，设计了10条引物用于MCDA反应，其中一条引物被工程化引入限制性内切酶识别位...
流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae）是机会致病菌，常引起儿童菌血症、脑膜炎和肺炎。本文开发了一种基于多重交叉置换扩增（MCDA）和实时荧光技术的快速检测方法。研究设计了10条引物用于H. influenzae实时MCDA反应，并按实时MCDA原理将核心引物修饰上限制性内切酶识别序列、荧光基团和淬灭基团。反应在...
为促进链置换扩增（SDA）技术在生物传感中的应用，作者设计了一种无标记、实时监测等温核酸扩增反应的策略。该策略利用荧光染料硫黄素T（ThT）对G-四链体（G-quadruplex）的特异性识别，将G-四链体结构引入SDA扩增产物中，从而实现扩增过程的实时荧光监测。该方法对传统线性SDA和指数型交叉触发SDA扩增均表现出良好性能，并可...
为实现对未标记分析物的实时流通检测，作者设计了一种具有可更换石英窗的微型流通池，并将其集成到便携式荧光检测系统中。石英窗内表面固定化适配体/量子点分子开关传感复合物，其中量子点作为高亮度荧光标记。该复合物被设计为分子开关：当流通液中的目标分析物与适配体结合时，适配体发生构象变化，导致携带量子点的检测寡核苷酸从表面释放，荧光强度实时下...
测量RNA合成及抑制水平对评估基因沉默策略至关重要。本文开发了一种基于金纳米颗粒（AuNPs）功能化荧光标记发夹DNA的直接实时RNA合成监测方法，即金纳米信标（Au-nanobeacon）。在发夹构型下，荧光基团靠近金纳米颗粒而发生荧光猝灭；与互补靶标杂交后，Au-nanobeacon构象重组，使荧光基团与AuNP分离，荧光发射恢...
本研究开发了一种基于绿色荧光蛋白的全细胞生物传感器，用于检测和定量 DNA 降解型大肠菌素诱导的大肠杆菌 SOS 应激反应。该传感器菌株为大肠杆菌 K-12 MG1655/pANO1::cda，其中 SOS 响应型 cda 启动子与 gfp 突变体融合；当 DNA 损伤或基因毒性应激激活 SOS 系统时，cda 启动子驱动 GFP ...
单链DNA（ssDNA）的形成与维持是复制、转录、修复和重组等DNA过程的关键环节。DNA解旋酶通过耦合ATP水解催化双链DNA（dsDNA）解链，使碱基暴露并进一步加工。为理解相关生物学过程，需要能够实时、高灵敏地监测解旋酶活性及其机制的探针。本文报道了一种无试剂荧光生物传感器的开发与应用，该传感器基于大肠杆菌单链DNA结合蛋白（...