自2020年新冠疫情暴发以来，全球结核病控制面临前所未有的挑战，亟需高效、经济的结核诊断技术。CRISPR-Cas技术进展提高了病原体检测能力。本研究建立了一种基于CRISPR-Cas12a的多重检测方法（MCMD），同时靶向两个保守插入序列IS6110和IS1081，用于检测结核分枝杆菌复合群（MTBC）。MCMD将氧化石墨烯（G...
背景：结核病（TB）是由结核分枝杆菌复合群（MTBC）引起的严重慢性传染病，因此开发新型、简便、快速且灵敏的MTBC检测方法对结核病防治具有重要意义。结果：本研究建立了多重交叉置换扩增（MCDA）联合纳米颗粒侧流层析生物传感器（LFB）同时检测MTBC两个靶基因（IS6110和mpb64）的方法（MCDA-LFB）。针对IS6110...
本文报道了一种名为LACD的CRISPR核酸检测平台，将环介导等温扩增（LAMP）与CRISPR-Cas12a介导的诊断相结合。作者将常规LAMP核心引物（FIP或BIP）的连接区工程化，引入PAM序列TTTT，使LAMP扩增产物含有可被CRISPR-Cas12a识别的特异PAM位点。在检测阶段，LAMP产物与gRNA/Cas12a...
结核分枝杆菌复合群（MTBC）是结核病主要病原体，多数病例发生在低收入人群，因此开发特异性、灵敏、低成本、快速床旁检测对实现WHO终结结核战略重要。本研究建立多重环介导等温扩增联合纳米颗粒侧流生物传感器（mLAMP-LFB）核酸检测策略用于MTBC检测。针对MTBC的IS6110和gyrB基因设计并验证两套LAMP引物。最佳反应条件...
本研究旨在开发一种简单可靠的结核分枝杆菌复合群（MTBC）检测方法，并初步验证其临床应用价值。作者建立了多重环介导等温扩增联合侧流层析生物传感器（LAMP-LFB）检测体系，设计两套分别靶向 MTBC IS6110 和 IS1081 序列的 LAMP 引物。通过在反应体系中加入 FITC 标记引物以及生物素标记的 dATP 和 dC...
分枝杆菌感染引起的肺病仍是全球公共卫生问题。结核分枝杆菌复合群（MTBC）与非结核分枝杆菌（NTM）所致肺部疾病临床表现高度相似，快速区分二者对合理治疗至关重要。本研究旨在建立基于抗体的生物传感器系统，用于识别 MTBC 和 NTM 感染。作者制备并表征了特异性识别分枝杆菌 Ag85B 蛋白的单克隆抗体（mAb）。其中，抗 Ag85...
环介导等温扩增（LAMP）无需温度循环即可扩增核酸，但常因引物间二聚体、非靶杂交和携带污染导致假阳性。本文建立一种由自避免分子识别系统（SAMRS）组分和南极热敏感尿嘧啶-DNA糖基化酶（AUDG）辅助的新型LAMP方法，称为AUDG-SAMRS-LAMP。将SAMRS组分引入LAMP引物3′端可提高特异性，完全避免由非靶杂交及引物...
结核分枝杆菌是仅次于人类免疫缺陷病毒的全球主要感染性病原体，传统检测方法存在灵敏度、特异性和周转时间不足等问题，亟需快速、灵敏的检测系统。本研究利用表面修饰的碲化镉量子点（CdTe-QDs）和金纳米颗粒（AuNPs），结合针对早期分泌抗原靶标6（ESAT-6）的两个特异性寡核苷酸探针，开发了一种夹心型荧光共振能量转移（FRET）生物...