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Phenotypic Screening Using High-Content Imaging to Identify Lysosomal pH Modulators in a Neuronal Cell Model.

ACS chemical neuroscience 2022 Chin MY, Ang KH, Davies J, Alquezar C 等 10 人

溶酶体是负责降解多种大分子的细胞器,其腔内高度酸性环境对溶酶体酶发挥最佳功能至关重要;溶酶体腔内酸性丧失会破坏细胞蛋白稳态,并与神经退行性变等年龄相关疾病相关。本研究利用一种新型稳健的溶酶体 pH 生物传感器 FIRE-pHLy,建立了基于细胞的荧光检测,用于高通量筛选,并将其应用于分化的 SH-SY5Y 神经母细胞瘤细胞。研究目标...

Identification of pharmacological inhibitors of conventional protein secretion.

Scientific reports 2018 Zhao L, Liu P, Boncompain G, Loos F 等 11 人

保留利用选择性钩(RUSH)系统可通过将荧光生物传感器(如绿色荧光蛋白 GFP 与链霉亲和素结合肽 SBP 的融合蛋白)定位到不同亚细胞区室,并利用过量链霉亲和素将其保留;加入生物素后竞争性破坏该相互作用,使生物传感器从“钩”上释放。本研究构建稳定共表达可溶性分泌型 SBP-GFP(ss-SBP-GFP)和内质网腔定位链霉亲和素的人...