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A Sort-Seq Approach to the Development of Single Fluorescent Protein Biosensors.

ACS chemical biology 2021 Koberstein JN, Stewart ML, Mighell TL, Smith CB 等 5 人

受单荧光蛋白生物传感器(SFPB)在生物研究中日益重要但理性设计困难驱动,作者提出一种名为 sort-seq 的大规模并行检测策略,以加速 SFPB 设计优化。SFPB 通常由圆形排列荧光蛋白、配体结合域及连接两者的连接子组成;由于缺乏预测方法,多数组合无法实现配体结合与荧光发射之间的别构耦合。该方法将分箱荧光激活细胞分选、下一代测...

Advantages of substituting bioluminescence for fluorescence in a resonance energy transfer-based periplasmic binding protein biosensor.

Biosensors & bioelectronics 2013 Dacres H, Michie M, Anderson A, Trowell SC

本研究构建了一种遗传编码麦芽糖生物传感器,由麦芽糖结合蛋白(MBP)N端融合绿色荧光蛋白(GFP2)、C端融合海肾荧光素酶变体(RLuc2)组成,形成生物发光共振能量转移(BRET2)检测系统。麦芽糖结合诱导 MBP 构象变化,使供体 RLuc2 与受体 GFP2 距离缩短,BRET 比率升高。与等效 FRET 传感器相比,BRET...