G蛋白偶联受体（GPCR）是美国食品药品监督管理局批准药物中最大的膜靶点家族，但其通过16种非视觉G蛋白信号转导器（统称transducerome）产生药效与副作用的机制仍不清楚。现有BRET/FRET检测平台难以在细胞内以单通路分辨率同时检测多种G蛋白。本文报道了开源TRUPATH平台，即14个经系统优化和验证的BRET2 Gαβ...
本研究构建了一种遗传编码麦芽糖生物传感器，由麦芽糖结合蛋白（MBP）N端融合绿色荧光蛋白（GFP2）、C端融合海肾荧光素酶变体（RLuc2）组成，形成生物发光共振能量转移（BRET2）检测系统。麦芽糖结合诱导 MBP 构象变化，使供体 RLuc2 与受体 GFP2 距离缩短，BRET 比率升高。与等效 FRET 传感器相比，BRET...
猫杯状病毒（FCV）是重要兽医病原体，可引起猫呼吸道疾病，并因细胞培养良好而常作为不可培养杯状病毒模型。本研究建立无细胞和两种细胞培养生物传感器体系，检测 FCV 蛋白酶活性。体系分别基于荧光素酶传感器（GloSensor）和第二代生物发光共振能量转移（BRET2）。GloSensor 在重排萤火虫荧光素酶中插入 FCV 蛋白酶切割...