Cell
2024
Janicot R, Maziarz M, Park JC, Zhao J 等 11 人
G蛋白偶联受体(GPCRs)是人类基因组编码的最大可药靶蛋白家族,但理解和靶向它们受到缺乏可靠工具测量其在生理相关背景中细微行为的限制。本文开发了一组紧凑的单载体 G 蛋白光学(ONE-GO)生物传感器构建体,作为可扩展平台,可方便地用于高保真测量几乎任何 GPCR 的 G 蛋白激活,即使受体在内源表达的原代细胞中。通过在原代心血管...
Journal of microbiology and biotechnology
2024
Park SG, Lee HJ, Ji T, Kim K 等 5 人
牙周病是由牙龈卟啉单胞菌等厌氧菌引起的慢性感染。本研究以牙龈卟啉单胞菌G蛋白(PGP)为靶标,通过系统进化配体指数富集(SELEX)方法筛选出特异性结合PGP的单链DNA适配体,该适配体由38个核苷酸组成。采用改良Western blot分析验证其选择性,结果显示适配体能与重组PGP、部分纯化PGP及牙龈卟啉单胞菌全菌裂解液结合,而...
Current protocols
2023
Janicot R, Park JC, Garcia-Marcos M
G蛋白偶联受体(GPCR)是最大的跨膜受体家族,通过异源三聚体G蛋白(Gαβγ)介导多种生理过程。由于GPCR在生物调控和药物靶点中的关键作用,能够测量其信号活性的工具具有重要价值。活细胞生物传感器可检测GPCR刺激后G蛋白活性,已成为研究GPCR/G蛋白信号的有效方法。本文详述利用基于生物发光共振能量转移(BRET)的光学生物传感...
IEEE sensors journal
2021
Wen C, Selling B, Yeliseev A, Xi J 等 9 人
本研究设计并表达了含天然 C 末端的水溶性人 μ 阿片受体变体 wsMOR-G2_Cter,并将其固定于可扩展石墨烯场效应晶体管(GFET)生物传感器表面,用于在脂质自由体系中实时、高灵敏地研究 μ 阿片受体(MOR)与 G 蛋白的相互作用。此前水溶性 MOR 变体已可在纳摩尔至皮摩尔范围检测阿片类物质,并提示脂质双分子层可能并非 ...
Nature chemical biology
2020
Olsen RHJ, DiBerto JF, English JG, Glaudin AM 等 11 人
G蛋白偶联受体(GPCR)是美国食品药品监督管理局批准药物中最大的膜靶点家族,但其通过16种非视觉G蛋白信号转导器(统称transducerome)产生药效与副作用的机制仍不清楚。现有BRET/FRET检测平台难以在细胞内以单通路分辨率同时检测多种G蛋白。本文报道了开源TRUPATH平台,即14个经系统优化和验证的BRET2 Gαβ...
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
2013
Tanaka K, Choi J, Stacey G
异源三聚体 GTP 结合蛋白(G 蛋白)及其受体是真核生物信号转导的关键组分。在植物中,G 蛋白参与种子萌发、花粉萌发、气孔关闭和微生物激发子响应等过程,其中部分效应通过细胞质游离钙离子浓度([Ca2+]cyt)变化实现。目前测量 [Ca2+]cyt 的方法包括钙敏感微电极、化学荧光染料以及基于发光或荧光指示剂的生物传感器。本章介绍...
The Journal of biological chemistry
2012
Busnelli M, Saulière A, Manning M, Bouvier M 等 6 人
本研究利用生物发光共振能量转移(BRET)生物传感器筛选人催产素受体(OTR)的功能选择性配体。结果显示,催产素(OT)可促进 OTR 与 Gq 及所有 Gi/o 亚型直接结合并激活;其他在关键结构/功能残基上发生取代的肽类类似物均表现出对 G 蛋白亚型的偏向性激活。除 OT 外,没有配体能激活 GoA 或 GoB;除一种例外,所有...