蛋白水解酶激活受体1（PAR1）是内源性G蛋白偶联受体，可被凝血酶在Arg41切割，也可在特定条件下被活化蛋白C（aPC）在Arg46切割，从而暴露不同锚定肽并驱动不同信号。本研究整合TRUPATH BRET生物传感器、TGFα脱落、PRESTO-Tango、TRE-MPRA及原代人血小板实验，系统比较两种蛋白酶对PAR1信号的选择...
G蛋白偶联受体（GPCR）是药物作用最广泛的信号蛋白，其功能选择性源于不同配体偏好激活特定通路。蛋白酶激活受体1（PAR1）是研究内源性偏向性信号的理想模型：凝血酶在Arg41切割PAR1，产生促血栓和破坏屏障的Gαq/Gα12信号；活化蛋白C（aPC）在Arg46切割，产生抗凝、细胞保护信号。作者整合TRUPATH、TGFα脱落、...
酶促与细胞信号生物传感器用于解析复杂生物系统的活性。针对G蛋白偶联受体（GPCR）——人体中药物靶点最丰富的蛋白家族——的监测传感器种类繁多，在用途、形式和功能上差异显著，其应用不断拓展了人们对这一重要蛋白家族的理解。本文简要总结该领域中日益重要的一个子集：用于测量受体偶联与选择性的转导器生物传感器，重点介绍用于测量受体与异源三聚体...
G蛋白偶联受体（GPCRs）仍是药物发现的核心靶点。其广泛表达和广泛的信号转导作用决定了它们在人体生理中的重要性。尽管超过800种GPCR共享共同结构，但独特差异决定配体特异性和通路选择性。从传统放射性配体结合实验和器官浴收缩反应提供的简化图景，到认识介导GPCR激活并将其转化为生理效应的分子介质，配体结合到生物学效应之间的路径日益...
G蛋白偶联受体（GPCR）激活会触发下游信号通路，其身份不仅取决于细胞遗传背景，还取决于与之相互作用的配体。为区分动物模型中导致治疗效应与不良反应的细胞内信号通路，需要能够在体内测量内源性 GPCR 信号的检测方法。为此，可遗传编码的生物传感器可在体内以细胞类型特异性方式表达，实时报告 GPCR 信号。为行为动物成像而开发的新显微和...
无标记（label-free）是描述多种前沿生物传感器技术的统称，这些技术因在七次跨膜 G 蛋白偶联受体（GPCR）药物发现中的应用而受到广泛关注。无标记生物传感器能够在活细胞中非侵入性地实时解析受体介导的应答，具有较高信息纹理和较广的信号通路覆盖范围，有助于研究经典单通路检测难以处理的受体整合信号转导生物学。该技术在人类原代细胞（...
生物发光共振能量转移（BRET）生物传感器在过去十年中已被广泛用于在活细胞中研究蛋白-蛋白相互作用和细胞内信号转导。本综述讨论为研究 G 蛋白偶联受体（GPCR）生物学、药理学和信号转导而开发的多种 BRET 生物传感器。GPCR 可形成包含 G 蛋白或 β-arrestin 的两类多蛋白信号复合物，具有功能选择性的药物可分别影响 ...
本研究利用生物发光共振能量转移（BRET）生物传感器筛选人催产素受体（OTR）的功能选择性配体。结果显示，催产素（OT）可促进 OTR 与 Gq 及所有 Gi/o 亚型直接结合并激活；其他在关键结构/功能残基上发生取代的肽类类似物均表现出对 G 蛋白亚型的偏向性激活。除 OT 外，没有配体能激活 GoA 或 GoB；除一种例外，所有...
提高药物研发生产力的需求持续推动药理检测技术创新。能够兼具体系分子检测与表型检测优势的技术，有望用于新药发现。本文简要综述当前用于细胞检测的无标记平台，并以动态质量重分布（DMR）技术为例，重点讨论这些检测的基本原理，同时提出将无标记检测谱与药物分子作用机制相关联的策略。现有证据表明，无标记细胞检测本质上属于表型检测，但允许进行分子...
配体导向功能选择性（biased agonism）是G蛋白偶联受体（GPCR）药物研究中的关键问题，不同配体可诱导受体产生不同信号行为。本文报道了一种用于全细胞传感的无标记光学生物传感器与微流控系统。该系统基于共振波导光栅（RWG）换能器，通过检测活细胞刺激诱导的动态质量重分布（DMR）实现无创、实时监测。微流控芯片可精确控制激动剂...
在基础研究和药物发现中，通过G蛋白偶联受体（GPCR）实现通路选择性的胞内信号转导，已成为精确调控细胞功能的新策略。GPCR在信号转导上常具有多效性，即内源性递质或外源性药物刺激受体后可同时激活多条胞内生化通路。本研究考察了一类新型GPCR激活剂的信号行为，该类化合物被设计为同时结合毒蕈碱型乙酰胆碱受体的正构递质结合位点和别构位点。...