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Directed Evolution of Soluble α-1,2-Fucosyltransferase Using Kanamycin Resistance Protein as a Phenotypic Reporter for Efficient Production of 2'-Fucosyllactose.

Journal of microbiology and biotechnology 2022

2'-岩藻糖基乳糖(2'-FL)是母乳中最丰富的岩藻糖基化寡糖,具有多种健康益处。然而,代谢工程大肠杆菌中 2'-FL 的生物合成常受限速酶 α-1,2-岩藻糖基转移酶(FucT2)不溶和不稳定限制。本研究旨在通过提高幽门螺杆菌 FucT2 的可溶表达增强 2'-FL 生产。由于 FucT2 结构未知,作者采用蛋白溶解度生物传感器,...

Analysis of Fucosylated Human Milk Trisaccharides in Biotechnological Context Using Genetically Encoded Biosensors.

Journal of visualized experiments : JoVE 2019 Enam F, Mansell TJ

人乳寡糖(HMOs)是人乳中具有重要婴儿健康益处的复杂碳水化合物,但其生物合成优化受限于单糖和糖苷键检测通量低。传统色谱/质谱方法通量通常仅为每天数百样品且难以自动化。本文报道一种遗传编码细菌全细胞生物传感器,通过异源表达岩藻糖苷酶实现岩藻糖基化 HMO 结构 2'-岩藻糖基乳糖(2'-FL)和 3-岩藻糖基乳糖(3-FL)的高通量...

Development of biosensor-based assays to identify anti-infective oligosaccharides.

Analytical biochemistry 2011 Lane JA, Mehra RK, Carrington SD, Hickey RM

目前公认乳寡糖可通过干扰病原微生物黏附到人类细胞而直接抑制其感染。许多乳源游离寡糖是上皮细胞表面碳水化合物的可溶性受体类似物,可作为受体诱饵使病原菌优先结合,从而减少宿主细胞黏附。然而,目前快速筛选此类寡糖的方法很少,相关研究多依赖耗时的人细胞系感染模型,因此需要一种快速、灵敏的方法检测微生物与乳寡糖的结合。本研究建立了多种基于生物...

表面等离子共振(SPR)生物传感器 乳寡糖2'-岩藻糖基乳糖空肠弯曲菌细菌黏附