Glycolysis maintains AMPK activation in sorafenib-induced Warburg effect.
肝细胞癌（HCC）是全球第二大致命癌症，仍缺乏根治性治疗。有氧糖酵解（Warburg 效应）是索拉非尼一线治疗诱导的主要耐药机制，并受代谢主调控因子 AMPK 调控。AMPK 激活是耐药所必需的，但其激活动态及调控机制研究较少。本研究通过工程化 Huh7 细胞稳定表达 AMPK 活性生物传感器 AMPKAR2，利用 FRET 高内容...
Imaging of Metabolic Status in 3D Cultures with an Improved AMPK FRET Biosensor for FLIM.
本文提出利用表达于肿瘤球体内的 Förster 共振能量转移（FRET）生物传感器，非侵入性绘制三维细胞培养中生化与生理变化的时空分布。重点报道改进的 AMP 活化蛋白激酶（AMPK）FRET 生物传感器 T2AMPKAR（mTurquoise2 AMPK Activity Reporter），用于荧光寿命成像（FLIM）读出，并在...
Visualization of Compartmentalized Kinase Activity Dynamics Using Adaptable BimKARs.
实时监测活细胞内激酶活性动态有助于理解信号转导的时空调控。本文报道了双分子激酶活性报告器（bimKARs）作为分子工具在增强激酶活性实时可视化方面的适应性。作者证明 bimKAR 设计具有高度通用性，可用于监测多种激酶，包括 JNK、ERK 和 AMPK。与单分子报告器相比，bimKAR 可具有显著增大的动态范围，从而揭示此前难以检...
A fluorescent reporter of AMPK activity and cellular energy stress.
本文报道了一种用于实时监测 AMPK 活性和细胞能量应激的荧光 FRET 报告系统 AMPKAR。该报告器在 COS-7 细胞中表达，当细胞受到 2-脱氧葡萄糖（2-DG）诱导的能量应激时，AMPK 被激活并引起 AMPKAR 构象变化，导致 FRET 比率发生动态改变；L-葡萄糖对照仅引起轻微下降且无后续信号升高。HPLC 测定显...
Endothelial nitric oxide synthase negatively regulates hydrogen peroxide-stimulated AMP-activated protein kinase in endothelial cells.
过氧化氢等活性氧深度参与内皮细胞信号转导。AMPK 在多种细胞中调控代谢反应，但内皮细胞氧化还原信号如何调控 AMPK 尚未完全阐明。本研究采用 RNA 干扰和药理学方法，证明 H2O2 是培养牛主动脉内皮细胞（BAECs）中 AMPK 的关键激活剂。H2O2 处理可快速、显著增加 AMPK 磷酸化，其 EC50 为 65±15 μ...