Methods in cell biology
2020
Morciano G, Imamura H, Patergnani S, Pedriali G 等 6 人
ATP是细胞能量代谢的核心代谢物,也是细胞内信号分子,其浓度变化与细胞功能、活力和命运密切相关。本文介绍两种基于遗传编码生物传感器的活细胞ATP检测方法:萤火虫荧光素酶生物发光法和ATeam FRET荧光生物传感器。前者利用线粒体靶向萤火虫荧光素酶(mtLuc)在细胞内催化荧光素(luciferin)、ATP和O2反应,生成激发态o...
Scientific reports
2016
Yoshida T, Kakizuka A, Imamura H
腺苷三磷酸(ATP)水平可反映细胞基本健康状况,但活细胞内ATP的精确测量仍缺乏合适方法。本文开发了一种新型BRET(生物发光共振能量转移)ATP生物传感器BTeam。BTeam由黄色荧光蛋白mVenus、枯草芽孢杆菌FoF1-ATP合酶ε亚基的ATP结合域以及不消耗ATP的荧光素酶NLuc组成。加入NLuc底物furimazine...
Journal of cellular physiology
2010
Kanno T, Yaguchi T, Nishizaki T
去甲肾上腺素(NA)在外周神经损伤后伴随交感神经长入背根神经节(DRG)释放,可能增强神经病理性疼痛。ATP是疼痛介质,但NA调控DRG中ATP动员的机制尚不清楚。本研究采用急性分离大鼠DRG神经元,以外翻膜片钳记录P2X受体通道单通道电流作为ATP生物传感器,并结合实时酶促NADPH荧光成像分析ATP动员;同时利用大鼠体内模型考察...