ACS sensors
2021
Wang X, Zhou S, Chu C, Yang M 等 6 人
DNA甲基化检测对癌症诊断和治疗具有重要意义。本文首次提出基于双甲基化敏感限制性内切酶与重组酶聚合酶扩增(RPA)辅助CRISPR/Cas13a系统(DESCS)的消化策略,用于准确灵敏测定位点特异性DNA甲基化。双内切酶体系选择性消化未甲基化靶标,对甲基化DNA无响应;完整甲基化靶标触发RPA快速放大,被消化的未甲基化靶标不能启动...
Biosensors & bioelectronics
2021
Wang X, Zhou S, Chu C, Yang M 等 6 人
本文报道了一种基于目标诱导转录放大触发 CRISPR/Cas13a 反式切割活性的超灵敏碱性磷酸酶(ALP)荧光传感策略(TITAC-Cas)。该体系以整合 T7 启动子(5′-磷酸)和转录模板的双链 DNA(5′P-dsDNA)作为 ALP 底物。无 ALP 时,5′P-dsDNA 被 λ 外切酶(λexo)降解,导致 T7 转录...
Biosensors & bioelectronics
2021
Sheng Y, Zhang T, Zhang S, Johnston M 等 16 人
快速、特异性定量早期癌症中低表达多种RNA极具临床价值但仍具挑战。本文提出一种由CRISPR/Cas13a系统和催化发夹DNA回路(CHDC)组成的双信号放大策略,并将其集成于可重复使用的电化学生物传感器,用于RNA的快速准确检测。通过CRISPR/Cas13a与CHDC的独特组合实现信号放大,在6 min读出时间和36 min总流...
Biosensors & bioelectronics
2021
Bruch R, Johnston M, Kling A, Mattmüller T 等 10 人
microRNA(miRNA)作为多种疾病的生物标志物,在临床和即时检测中日益重要,但单一miRNA通常不足以明确诊断,需要同时评估多个miRNA。本研究设计并实现了多种多重电化学微流控生物传感器,将单通道划分为多个孵育区,形成四种新型芯片设计,用于无靶标扩增条件下同时定量最多8个miRNA,命名为CRISPR-Biosensor ...
Analytical chemistry
2021
Zhou T, Huang M, Lin J, Huang R 等 5 人
成簇规律间隔短回文重复序列(CRISPR)及CRISPR相关蛋白(Cas)系统因其高保真性、可编程性和高效信号放大能力,为下一代生物传感器提供了新途径。开发基于CRISPR/Cas的可视化检测系统有助于生物标志物的即时诊断。现有基于CRISPR/Cas9的可视化检测方法受Cas9固有特性限制。本文探索了Cas13a对含核糖核苷酸的D...