Metabolically-targeted dCas9 expression in bacteria.
在复杂微生物组中将基因表达限制于相关细菌物种是一个未解决问题。在人类微生物组背景下，一种理想的靶标代谢活性是葡萄糖醛酸利用酶（GUS），其参与人体胃肠道中葡萄糖醛酸化化合物的毒性再激活，包括化疗药物伊立替康。我们利用细菌中 GUS 酶分布的差异来区分具有 GUS 活性的细菌，并将葡萄糖醛酸响应型 GusR 转录因子重新用作生物传感器...
Biosensor-assisted titratable CRISPRi high-throughput (BATCH) screening for over-production phenotypes.
随着代谢途径和合成生物学工具快速发展，微生物生物制造中如何最优重连代谢通量并加速高通量表型筛选仍是挑战。本文建立了生物传感器辅助可滴定 CRISPRi 高通量（BATCH）筛选方法，将可滴定错配 CRISPR 干扰与生物传感器介导的高产表型筛选结合，用于大肠杆菌。作者首先开发可编程错配 CRISPRi，通过单管 sgRNA 池（每个...