DNA immobilization and detection using DNA binding proteins.
生物传感器中生物识别元件的固定方式直接影响最终性能。在 DNA 检测中,常采用(链霉)亲和素-生物素亲和作用固定生物素标记寡核苷酸或 PCR 扩增子。本文提出 DNA 结合蛋白作为 DNA 固定与检测的通用锚定分子,利用特定 DNA 结合蛋白与其双链 DNA 结合位点之间强而特异的亲和作用。这些结合位点可在合成或 PCR 过程中引入...
生物传感器中生物识别元件的固定方式直接影响最终性能。在 DNA 检测中,常采用(链霉)亲和素-生物素亲和作用固定生物素标记寡核苷酸或 PCR 扩增子。本文提出 DNA 结合蛋白作为 DNA 固定与检测的通用锚定分子,利用特定 DNA 结合蛋白与其双链 DNA 结合位点之间强而特异的亲和作用。这些结合位点可在合成或 PCR 过程中引入...
转录因子(TFs)是决定细胞命运的关键蛋白,已被认为是疾病诊断和治疗的重要标志物。本文报道了一种基于CRISPR/Cas12a系统的高灵敏转录因子生物传感器。该传感器基于Cas12a-crRNA与TFs对一种称为激活剂的双链DNA(dsDNA)的竞争性结合。无TF时,激活剂可被Cas12a-crRNA识别并引发Cas12a的DNas...
本文报道了一种基于双链DNA–金纳米颗粒(AuNP)聚集体的比色生物传感器,用于直接检测序列特异性DNA结合蛋白SQUAMOSA启动子结合样蛋白12(SPL-12)。作者采用盐老化法将巯基修饰DNA1和DNA2分别固定到AuNP表面,再将两种DNA–AuNP混合,使互补序列杂交形成双链DNA–Au聚集体。该聚集体平均粒径约160 n...
序列特异性DNA结合蛋白(DBP)的灵敏、可靠检测对蛋白质组学、基因组学和生物医学具有重要意义。本文报道了一种基于荧光放大共轭聚合物的新型无标记策略,用于超灵敏、可视、定量和“开启型”检测DBP。该策略利用阳离子共轭聚合物(CCP)与嵌入染料构建Förster共振能量转移(FRET)体系,以关键转录因子核因子κB(NF-κB)为模型...
本研究开发了一种基于免疫层析的侧流生物传感器,用于快速检测 DNA 结合蛋白。该传感器由样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸收垫四部分组成。含 c-jun 蛋白结合共识序列的 5′-巯基修饰 DNA 探针通过硫醇端固定在 15 nm 金纳米颗粒上,并与 5′-生物素修饰互补探针杂交形成双链 DNA 探针;抗 c-jun 单克隆抗体固定于...
本文报道了一种基于核酸外切酶III(Exo III)保护的金纳米颗粒(AuNP)比色生物传感策略,用于快速、灵敏且可视地检测序列特异性DNA结合蛋白。该策略依赖靶蛋白与其结合序列的特异性相互作用,保护DNA交联AuNP聚集体免受Exo III介导的消化。作者发现,靶蛋白结合到聚集AuNP网络中的结合序列后,可对DNA产生稳定且长时期...