尿路感染（UTI）是最常见的感染性疾病之一，亟需快速诊断以及时干预。尿液分子可反映宿主细胞对病原感染的应答，可作为UTI诊断标志物，但在一锅法中实现尿液标志物的灵敏多重检测仍具挑战。本文开发了一种基于变构DNAzyme的生物传感器SMART（用于UTI诊断的ATP与miRNA灵敏多重检测）。多个传感模块被整合到一条化学计量精确、热力...
金黄色葡萄球菌是奶牛乳腺炎和食源性疾病的主要病原体，对公共卫生和食品安全构成重大威胁。本研究开发了一种基于固相分离与信号放大的增强型荧光生物传感器，用于牛奶样品中金黄色葡萄球菌的快速检测。该传感器以金磁性纳米颗粒（Au@Fe3O4）为固相载体，通过硫醇–金配位将底物链特异性固定于颗粒表面；随后利用DNAzyme、L链和Y链的顺序杂交...
金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus, SA）是医院感染中最常见的细菌之一，对其耐甲氧西林表型进行灵敏、高效分析对改善肺炎护理具有重要意义。然而，在无酶条件下同时获得良好灵敏度与特异性的耐甲氧西林分析仍具挑战。本文开发了一种基于三重分支催化发夹组装（catalytic hairpin assembly, CHA...
8-17 DNAzyme（8-17、17E、Mg5 和 17EV1）是体外筛选获得的催化性 DNA 分子，可切割互补 RNA。其相似催化核心中的保守残基与金属离子共同促进催化反应。基于凸环（bulge loop）中保守性较低的残基（W12、A15、A15.0）及内部茎对催化活性的贡献，本研究对 8-17 DNAzyme 的催化核心进...
霍乱弧菌（Vibrio cholerae, Vc）是霍乱的病原菌，其污染水和海产品会引发严重食品安全问题，尤其影响海产品行业。本文旨在建立 Vc 的快速检测方法。作者使用未修饰 DNA 文库，通过九轮体外选择（SELEX）筛选出可特异性识别 Vc 的 DNAzyme，并基于荧光检测和凝胶电泳评估其活性。最终获得活性与特异性均较好的 ...
鱼溃疡病由杀鲑气单胞菌（Aeromonas salmonicida）引起，可致鲑科、鲤科等鱼类败血症并快速死亡。本研究针对该菌，通过指数富集系统进化配体（SELEX）技术筛选 DNAzyme，获得 5 条富集率最高的候选序列，富集率分别为 34.78%、23.60%、8.91%、2.89% 和 2.34%。其中活性最高的 D-AS-...
尽管miRNA在人体内含量极低，却与肿瘤等疾病中基因异常表达密切相关，因此miRNA的灵敏检测对重大疾病防治具有重要意义。本研究开发了一种基于双发夹分子信标与脱氧核酶（DNAzyme）协同作用的无标记荧光传感策略，用于高灵敏检测miRNA-21。目标miRNA-21通过互补配对促进DNAzyme1与DNAzyme2组装，形成具有完整...
本文报道了一种基于趾端介导催化发夹组装（CHA）和DNAzyme级联水解反应的无酶生物传感器，用于霉菌毒素检测。当霉菌毒素存在时，适配体与目标物特异性结合并释放触发DNA；触发DNA启动趾端介导CHA，产生大量带有四个趾端的部分双链B/C，用于组装DNAzyme级联水解反应。B/C双链、DNA1和DNA2通过协同自组装形成Mg2+依...
溶藻弧菌是水产养殖和食品安全中重要的致病菌，传统培养、PCR和ELISA方法存在耗时长、依赖仪器或低温保存等问题。本研究以溶藻弧菌粗胞外混合物（CEM-VA）为靶标，采用磁珠SELEX技术筛选获得特异性RNA切割DNAzyme，并通过荧光强度和凝胶电泳评价候选序列活性。筛选得到的DNAzyme DT1对溶藻弧菌具有较高特异性，检出限...
铅离子（Pb2+）是分布广、毒性强的常见重金属离子，对人体危害显著。本文基于 Pb2+ 依赖型 DNAzyme 和外切酶 III（Exo III）辅助级联信号放大，构建了一种低噪声比率荧光生物传感器。首先，DNAzyme 底物链（S-DNA）通过生物素与链霉亲和素的结合固定在磁珠（MBs）表面，随后酶链（E-DNA）与 S-DNA ...
无机焦磷酸酶（PPase）表达水平被认为是多种癌症的潜在生物标志物，其预后价值已在肺癌、结直肠癌和甲亢患者中评估。然而，现有PPase检测常依赖特定材料，反应复杂、耗时，且线性范围和灵敏度有限，限制了早期临床诊断应用。本文开发了一种基于DNAzyme的无标记荧光生物传感器用于检测PPase活性。在PPase存在时，PPi–Cu2+–...
创伤弧菌（Vibrio vulnificus）是引起海产品相关疾病的重要致病菌，传统培养、PCR 和 LAMP 方法耗时且依赖设备。为快速检测水产品中的该菌，作者通过体外筛选与突变获得 RNA 切割型 DNA 酶 RFD-VV-M2，其活性、特异性和灵敏度最高。该 DNA 酶 5′ 端连接淬灭基团，并与 3′ 端 FAM 标记底物形...
金黄色葡萄球菌（S. aureus）及其耐甲氧西林菌株（MRSA）的早期检测对公共卫生和临床感染控制具有重要意义。本文报道了一种基于发夹探针介导的 DNA 电路，用于检测 S. aureus 的 mecA 基因。该体系串联外切酶 III（Exo III）辅助循环信号放大与 DNAzyme 介导的切割反应。当目标 mecA 存在时，H...
双酚A（BPA）对人体健康有害，因此开发新的BPA检测方法具有重要意义。本文设计了一种BPA生物传感器，将放大DNA电路与Mg2+依赖性DNAzyme整合到传感系统中。BPA-适配体结合可激活基于toehold介导链置换反应的DNA电路，实现信号放大。通过协同DNA杂交形成具有催化活性的Mg2+依赖性DNAzyme，其可将双标记底物...
本文提出一种基于 DNAzyme/MnCoPBAs-PDANCs 复合物的新型荧光生物传感器，用于 Pb2+ 和 Ag+ 离子的检测。GR-5/GC-rich DNAzyme 通过 π-π 堆积作用锚定并猝灭在聚多巴胺杂化三维金属-有机框架 MnCoPBAs-PDANCs 表面。加入 Pb2+ 后，DNAzyme 复合物发生催化内切...
除基因编辑外，CRISPR/Cas系统因靶标识别准确度高而成为生物传感领域的新选择，但现有传感器多限于核酸分析，且在复杂样品中适应性差、灵敏度不足。本文提出若干新策略突破瓶颈：首先，通过设计适配体（用于蛋白质）和DNAzyme（用于金属离子）等功能DNA，将非核酸靶标的识别事件转导为CRISPR/Cas12a反式切割的激活；其次，利...
本文开发、优化并验证了一种基于级联循环放大点亮铜纳米颗粒的荧光生物传感器。该传感器采用双模块级联循环放大策略：DNAzyme循环放大单元将金属离子信号转化为特定DNA序列，线性/指数整合放大单元再将所得DNA编码转化为相同的胸腺嘧啶（T）富集DNA模板。T富集支架可诱导生成红色荧光铜纳米颗粒，在340 nm激发下于625 nm发射荧...
镍是重要金属，其生物传感检测长期是分析难题。DNA 已广泛用于金属检测，但此前未见用于 Ni2+ 的 DNA 传感器。DNAzyme 是 DNA 催化剂，可招募金属离子参与催化。本研究以含 50 个随机核苷酸区域的文库，在 Ni2+ 存在下进行体外选择 RNA 切割 DNAzyme。为提高 Ni2+ 结合能力，在切割位点插入甘氨酰-...
铅离子（Pb2+）的灵敏检测对食品安全、环境监测和人类健康具有重要意义。为此，本文提出一种新型荧光生物传感器——DNAzyme 功能化 R-藻红蛋白（DNAzyme-R-PE），用于 Pb2+ 分析。该传感器通过将 Iowa Black® FQ 修饰的 DNAzyme–底物复合物固定在 SPDP 功能化 R-PE 表面制备而成。在无...
鳗弧菌（Vibrio anguillarum）是造成水产鱼类严重损失的重要病原菌，其快速检测与防控十分关键。DNAzyme 是具有催化活性的 DNA 分子，稳定性好。本研究以鳗弧菌粗细胞外基质（CEM）为靶标，采用未修饰 DNA 文库进行体外筛选，较以往标记文库更易推广。经 7 轮筛选获得高活性、高特异性 DNAzyme VAE-2...