Characterization of low affinity Fcγ receptor biotinylation under controlled reaction conditions by mass spectrometry and ligand binding analysis.

Protein science : a publication of the Protein Society 2016 Geuijen KP, Egging DF, Bartels S, Schouten J 等 6 人

蛋白化学生物素化及链霉亲和素或抗生物素捕获常作为将蛋白固定于生物传感器表面的可控替代方案。生物素化可能阻断感兴趣相互作用位点，降低表观活性；最小生物素化可减轻活性损失，但若标记参与结合的氨基酸仍可能阻断结合位点。本文以低亲和力 Fcγ 受体为模型，开展最小标记反应条件优化研究。该类蛋白在 IgG 结合活性位点含多个赖氨酸，适合研究最...

表面等离子共振(SPR)生物传感器 Fcγ受体生物素化最小标记IgG结合

Biotinylation of the Fcγ receptor ectodomains by mammalian cell co-transfection: application to the development of a surface plasmon resonance-based assay.

Journal of molecular recognition : JMR 2016 Dorion-Thibaudeau J, St-Laurent G, Raymond C, De Crescenzo G 等 5 人

本文报道了四种生物素化 Fcγ 受体（FcγR）胞外域的生产及其在链霉亲和素生物传感器表面上的稳定捕获。受体生物素化采用哺乳动物细胞共转染策略：将编码 FcγR 胞外域（融合生物素受体肽 BAP）和 BirA 酶的质粒共同转染细胞，实现胞内定点生物素化，并与标准体外酶法生物素化在生物素化水平和产量方面进行比较。两种策略制备的生物素化...

表面等离子共振(SPR)生物传感器 Fcγ受体生物素化单克隆抗体糖基化链霉亲和素捕获