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Conformational antibody binding to a native, cell-free expressed GPCR in block copolymer membranes.

PloS one 2014 de Hoog HP, Lin JieRong EM, Banerjee S, Décaillot FM 等 5 人

G蛋白偶联受体(GPCR)在生理过程中起关键作用,是重要药物靶点。然而,由于其在稳定膜环境外固有不稳定,且难以找到合适表达体系,其生物物理表征极具挑战。本文展示了GPCR CXCR4的无细胞表达及其直接嵌入双嵌段共聚物膜的方法。聚合物稳定化的CXCR4可方便地固定到生物传感器芯片上,用于无标签结合分析。利用构象敏感抗体进行动力学表征...

表面等离子共振(SPR)生物传感器 GPCRCXCR4聚合物囊泡无细胞表达

A biosensor to monitor dynamic regulation and function of tumour suppressor PTEN in living cells.

Nature communications 2014 Lima-Fernandes E, Misticone S, Boularan C, Paradis JS 等 10 人

肿瘤抑制蛋白PTEN是一种脂质磷酸酶,通过去磷酸化PIP3负调控PI3K/AKT通路。直接、快速、灵敏地监测PTEN构象与功能,是开发增强或恢复PTEN依赖性通路抗癌药物的重要前提。本文构建了一种分子内生物发光共振能量转移(BRET)生物传感器Rluc-PTEN-YFP,将Rluc融合于PTEN N端、YFP融合于PTEN C端,用...

Use of label-free optical biosensors to detect modulation of potassium channels by G-protein coupled receptors.

Journal of visualized experiments : JoVE 2014 Fleming MR, Shamah SM, Kaczmarek LK

离子通道通过选择性允许离子跨膜流动控制神经元等可兴奋细胞的电特性。为调节神经元兴奋性,信号蛋白和分子会改变离子通道的生物物理性质,并常与通道结合形成异源通道复合物。传统检测通道与调节蛋白相互作用的实验需要外源标记,可能改变蛋白行为并降低生理相关性,且难以提供活细胞中相互作用的时间过程信息。光学生物传感器(如X-BODY Biosci...