滚环扩增（RCA）是聚合酶链式反应（PCR）的重要替代方案，尤其适用于需要快速、灵敏、可靠检测大量样本的疫情场景。本文首次报道利用光纤中飞秒激光加工形成的微腔内联马赫-曾德尔干涉仪（µIMZI），对等温 DNA 扩增进行直接、实时、无标记监测。该方案可在皮升级样品体积内完成光学分析。生物传感器的选择性由固定在微腔表面的 DNA 引物...
DNA检测中PCR高特异但依赖热循环仪等实验室设备，限制现场应用。等温扩增技术如锁探针（PLP）介导的滚环扩增（RCA）具有优势，但通常仍需仪器读取扩增产物。为克服该限制并保留PLP-RCA优势，作者开发了一种基于pH变化的比色检测方法。该方法利用DNA聚合酶在等温扩增过程中释放质子导致反应体系pH下降，使pH指示剂酚红发生颜色变化...
本文报道了一种用于监测滚环扩增（RCA）的比色方法，以检测 H5N1 流感病毒。首先，H5N1 目标序列与锁式探针（PLP）杂交，随后在 T4 DNA 连接酶作用下使 PLP 环化。环化探针作为模板，在大片段 Bst DNA 聚合酶催化下进行超支滚环扩增（HRCA）。反应过程中 DNA 聚合产生焦磷酸（PPi），PPi 螯合缓冲液中...
本文开发了一种用于高灵敏检测 H5N1 流感病毒的等温扩增方法。锁式探针（padlock probe, PLP）特异性结合 H5N1 靶序列，并在 T4 DNA 连接酶作用下环化。随后，以 Phi29 DNA 聚合酶为催化酶，对环化探针进行超支化滚环扩增（HRCA），生成大量双链 DNA 产物。SYBR Green 染料嵌入扩增产生...
甲型H5N1流感病毒可感染人类并导致死亡，暴发前及时诊断对公共卫生至关重要。现有临床生化诊断方法仍存在不足，市售H5N1诊断试剂盒多依赖传统单克隆抗体，难以满足临床应用需求。纳米抗体（Nanobody/VHH）具有分子量小、特异性高、稳定性好和易于大量表达等优点，是诊断与治疗的潜在工具。本研究通过噬菌体展示技术从VHH文库中筛选获得...