Scientific reports
2020
Fernández-Puente E, Sánchez-Martín MA, de Andrés J, Rodríguez-Izquierdo L 等 6 人
过氧化氢(H2O2)是细胞内重要的信号分子,参与骨骼肌的生理与病理过程,但传统检测方法常产生假象。HyPer 是一种基因编码荧光生物传感器,可实时、特异性地检测细胞内 H2O2。本研究旨在开发并优化在 C2C12 成肌细胞/肌管以及 C57BL/6J 小鼠成熟骨骼肌纤维中表达 HyPer 的方法,并实时测量这些细胞中的胞内 H2O2...
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
2017
Mishina NM, Belousov VV
受激发射损耗(STED)显微镜是一种常用的超分辨成像技术。除合成染料和荧光蛋白外,遗传编码生物传感器也可作为 STED 荧光团使用。将生物传感器与目标蛋白融合,可在活细胞内实现亚衍射极限的大分子结构成像,同时获取细胞活动相关的功能信息。本文介绍了一种用于 HyPer2 生物传感器活细胞 STED 成像的实验方案。HyPer2 是一种...
Nano letters
2015
Mishina NM, Mishin AS, Belyaev Y, Bogdanova EA 等 7 人
在多种超分辨显微技术中,受激发射损耗(STED)显微术能在高空间分辨率下实现最佳时间分辨率,从而支持突破衍射极限的活细胞成像。然而,STED 及多数超分辨方法通常只从原始数据中提取荧光团位置信息。为拓展超分辨技术的应用,本文报道了一种动态生物传感器的活细胞 STED 显微成像。作者使用荧光过氧化氢传感器 HyPer2 进行亚衍射成像...
Methods in enzymology
2013
Sartoretto JL, Kalwa H, Romero N, Michel T
一氧化氮(NO)和过氧化氢(H2O2)均在心肌细胞内合成,并参与心血管反应调控,但二者在心肌细胞信号中的相互关系尚不清楚。成年小鼠心肌细胞是研究活性氧与活性氮受体调控信号的重要模型,但培养存活时间短且蛋白量有限。本文利用化学传感器和生物传感器开展成年心肌细胞内 H2O2 与 NO 的活体成像研究,详细描述了适合成像的心肌细胞分离与培...
Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America
2011
Sartoretto JL, Kalwa H, Pluth MD, Lippard SJ 等 5 人
一氧化氮(NO)和过氧化氢(H2O2)均在心肌细胞内合成,并参与心血管信号调节。心肌细胞同时表达内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和神经型一氧化氮合酶(nNOS),但两种酶在心肌信号中的差异作用以及活性氧与活性氮物种之间的互作仍不清楚。作者利用新开发的 NO 化学传感器 Cu2(FL2E) 检测野生型、eNOS 敲除和 nNOS 敲除小...