eLife
2018
Sallin O, Reymond L, Gondrand C, Raith F 等 6 人
本文报道了一类用于定量活细胞中游离烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）及还原型/氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH/NADP+）比值的半合成荧光生物传感器。传感机制是通过 NAD(P) 与传感器蛋白组分结合，调控两个合成荧光团的空间距离，从而改变荧光共振能量转移（FRET）效率。该传感器具有大动态范围、长波长激发、pH 不敏感、...
Photosynthesis research
2017
Wilkening S, Schmitt FJ, Horch M, Zebger I 等 6 人
荧光生物传感器 Frex 近期被提出用于定量活细胞内 NADH 浓度。本文采用时间积分和时间分辨荧光光谱，对纯化 Frex 蛋白在 NAD+ 存在及不同 pH 下的响应进行表征，以评估其体内应用潜力。结果显示，Frex 荧光对 NADH 的依赖可用 Hill 函数描述，半最大响应浓度 KD 约 4 μM，Hill 系数 n 约 2。...
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
2014
Hung YP, Yellen G
NADH 是多种代谢反应中必需的氧化还原辅因子，胞质 NADH–NAD+ 氧化还原状态是糖酵解的关键参数。传统 NADH 测定依赖化学分析或自荧光成像，无法在单个活细胞的胞质中特异性评估 NADH。作者将细菌 NADH 结合蛋白 Rex 与绿色荧光蛋白变体环状置换 T-Sapphire 融合，构建遗传编码荧光生物传感器 Peredo...